氯吡格雷（Clopidogrel,Clop）联合阿司匹林的抗血栓疗法已作为急性冠脉综合征（Acute coronary syndrome,ACS）和经皮冠脉介入治疗（PCI）的“金标准”。但临床研究发现,患有糖尿病的ACS患者易发生“氯吡格雷抵抗”现象,这限制了Clop在糖尿病患者的临床应用和潜在受益。现有研究表明,糖尿病引起的氯吡格雷抵抗与Clop的吸收和代谢过程密切相关。Clop已被证明是P-糖蛋白（P-gp）的底物,它在肠道中的水平会影响Clop在宿主体内的吸收。Clop一旦吸收入血,85%的Clop经肝脏中羧酸酯酶1（CES1）水解为无活性的氯吡格雷酸（Clop-acid）,剩余15%经细胞色素P450酶（CYPs）氧化生成活性代谢物（Clop-AM）,产生抗血小板作用。目前认为糖尿病增加Clop抵抗的主要原因是糖尿病状态下,小肠P-gp水平增加,引起Clop的吸收减少,进而降低Clop-AM的体内暴露量。但是,复杂的糖尿病环境是如何改变P-gp的水平,其决定因素和潜在的机制仍有待阐明。大量研究证明,肠道微生物与糖尿病的发生和发展密切相关。同时,肠道菌能通过修饰肠或肝脏中药物转运体和代谢酶的基因表达干扰宿主对药物的吸收和代谢。基于肠道菌在糖尿病发生及药物处置中的双重作用,我们推测,肠道菌可能影响Clop的药代动力学。本课题以高脂-STZ诱导的二型糖尿病（T2DM,Type 2 diabetes mellitus）大鼠为模型,利用混合抗生素（甲硝唑、氨苄西林、万古霉素和新霉素）破坏肠道菌群,进而观察抗生素对Clop吸收和代谢的影响及相关机制。此研究有助于揭示糖尿病、肠道菌群和药物代谢之间的关系,对提高糖尿病患者安全、有效地使用抗血小板药物,预防糖尿病患者血栓性疾病的发生发展具有重要意义。首先,我们观察了抗生素处理前后,糖尿病大鼠血清、肝脏和小肠中各项生化指标的变化。结果显示,抗生素处理5天后,T2DM大鼠症状,包括高血糖、高脂血症、胰岛素抵抗、氧化应激、肝功能障碍和炎症均显著减轻。同时,药代动力学的结果显示,抗生素处理后,T2DM大鼠血浆中Clop,Clop-AM和Clop-acid暴露量显著增加。接下来,分析抗生素处理前后大鼠肝脏中Clop代谢酶水平变化。结果表明在T2DM大鼠中,抗生素处理显著增加了肝CES、CYP2B、CYP2C9、CYP2C19的表达和酶活性。Clop体外转化研究显示,抗生素治疗后,T2DM大鼠肝微粒体在有/无酯酶抑制剂氟化钾（KF）情况下,生成Clop-AM均略有减少,与体内的变化相反,说明T2DM大鼠经抗生素处理后Clop-AM血浆暴露量升高与Clop肝代谢无关。但研究发现小肠P-gp及其核受体PXR的m RNA和蛋白水平经抗生素处理后显著降低。基于P-gp在Clop-AM产生中的关键作用,我们推断,抗生素处理后T2DM大鼠体内Clop、Clop-AM和Clop-acid暴露增加可能与P-gp水平下调,促进Clop吸收有关。进一步,在细胞水平研究发现,抗生素处理后,Clop代谢酶和转运体的水平或活性在T2DM大鼠与LO2/SW480细胞中的的变化趋势完全不同,说明抗生素对大鼠CYPs和P-gp水平的影响与抗生素的直接细胞作用无关。最后,大鼠粪菌16S r RNA测序分析显示,T2DM大鼠肠道菌群发生紊乱,其多样性显著下降,菌群的组成和结构明显改变,包括厚壁菌门丰度减少,拟杆菌门和变形菌门丰度增加。而混合抗生素处理后,微生物数量下降95%,相对丰度以变形菌门（＞90%）为主,表明5天的混合抗生素处理严重地破坏了T2DM大鼠的肠道微生态。综上所述,在T2DM大鼠中,抗生素诱导的肠道微生物群破坏,增加了Clop-AM的全身暴露并减轻了糖尿病症状。由于大量研究证实,糖尿病相关因子,包括葡萄糖、胰岛素、和细胞因子影响P-gp的表达,我们推断,肠道菌群破坏引起的T2DM症状改善,可能是P-gp水平降低和Clop-AM全身暴露量增加的原因之一。提示调节肠道微生物群可作为一种有效的治疗策略,减少氯吡格雷抵抗。