转录因子SITSO1调控番茄果实成熟的研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kathy052
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番茄(Solanum lycopersicum)因其生长周期相对较短、基因组较小、基因组质量高、遗传转化体系成熟、遗传研究深入、突变体丰富、果实成熟突变体特征易于观察等特点成为了果实成熟研究的模式植物之一。近些年来,番茄果实发育成熟的调控网络的研究越发深入,许多参与了番茄果实发育成熟调控的转录因子被克隆出来。CPP转录因子家族是一个小转录因子家族,在植物的花发育和生殖组织的性别分化中起着调控作用。番茄基因组中存在4个CPP基因。本研究解析了拟南芥CPP基因家族中的TSO1基因在番茄中的同源基因SlTSO1在番茄发育中的生物学功能,发现该基因参与番茄果实发育成熟调控和叶片形态建成,主要研究结果如下:1.番茄基因组中鉴定出4个CPP基因,分别是Solyc07g020710、Solyc08g067150、Solyc09g082500、Solyc12g007180,根据其在染色体上的位置分别命名为SlCPP1、SlCPP2、SlCPP3和SlCPP4,SlCPP1在各个组织中都有表达,SlCPP2在果实中表达最高,SlCPP3在花中表达最高,而SlCPP4在幼嫩叶片和未成熟果实中均有较高的表达。SlCPP4为拟南芥TSO1基因的同源基因,因此SlCPP4也称为SlTSO1。2.基因编辑敲除番茄SlTSO1基因,植株无明显表型,而超量植株不同株系之间的表型存在差异。超量表达SlTSO1造成转基因植株叶片缺刻程度减少,果实成熟受到抑制,而有部分表达量提高了 200-800倍植株的果实成熟时无法破色变红,表达量1000倍以上的可正常破色成熟。这些表型的差异与SlTSO1表达量高低存在相关性。我们推测SlTSO1在番茄果实成熟调控方面存在剂量效应。3.基因表达量分析结果显示,RIN、PSY1、Cel2和IAA9等成熟相关基因在SlTSO1超量表达植株红熟果实中的表达量显著降低,表明其表达可能受SlTSO1负调控。4.酵母自激活表明STSO1无自激活活性,酵母双杂交实验表明,SlTSO1和SlMYB3R1互作,而与RIN、IAA9、MADS-MC不互作,由结果推测SlTSO1和SlMYB3R1可能以复合体的形式行使功能。5.启动子分析显示RIN和IA49基因启动子区域包含SlTSO1结合的潜在顺式元件,酵母单杂交实验证明SlTSO1能够与RIN和LAA9启动子区域结合,表明SlTSO1可能通过直接调控这些基因的表达调控番茄果实成熟。6.对CPP家族基因进行进化分析发现,SICPP1和SlTSO1、SlCPP2和SlCPP3之间具有高度相似的保守结构域,SlTSO1超量转基因材料中SICPP1表达量显著下调,而SlCPP1和SlTSO1双敲除转基因株系,其表型依旧与遗传转化材料AC一致,推测CPP家族4个基因存在功能冗余。
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