【背景】长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)原先在基因组中普遍被视为“转录垃圾”,是不含有任何功能作用的无效的核苷酸片段。最近研究得知,尽管lncRNA不编码蛋白质,但它涉及生命活动与生理过程的很多环节,可通过若干信号通路间接地对基因的表达水平进行精细调控。膀胱癌的发病率在所有泌尿系统恶性肿瘤中名列榜首,是最常见的泌尿系肿瘤。其频繁地发病与复发一直困扰着泌尿外科大夫与患者,且膀胱癌的病因机制皆不清楚。因此,研究膀胱癌的发生与进展在分子生物学水平上的相关机制,探求明显的标志物与可利用的治疗靶点对患者的治疗相当重要。当前lncRNA与膀胱癌的联系逐渐受到学术界的重视,尤其是LncRNA MEG3在很多肿瘤中表达水平明显降低,于是被推测具有抑制癌症的功效,包括抑制癌症的生长、浸润与转移等,但是长链非编码RNA MEG3对膀胱癌发生、发展的作用以及作用机制尚不清楚。【目的】1.检测MEG3在膀胱癌中的表达水平高低,并探讨MEG3的表达水平高低和临床膀胱癌分级、分期之间的联系;2.研究长链非编码RNA MEG3对人膀胱癌细胞增殖、凋亡、上皮向间质转化、侵袭、迁移的作用及分子机制研究;【方法】1.收集来协和医院做膀胱全切手术的病例35个,再剪取标本中的癌组织以及毗邻正常组织,然后提取RNA并接着逆转录,最后检测MEG3的相对表达量,并且探讨MEG3的表达水平和临床分级、分期的联系;2.生物公司合成meg3sirna用以干扰meg3的表达水平,人工构建meg3过表达载体pcdna-meg3用以升高meg3的表达水平,与lipol2000一起分别转染到t24、ej中;3.meg3对膀胱癌细胞增殖、凋亡、上皮向间质转化、侵袭、迁移的作用:mtt检测膀胱癌细胞的生存率,克隆形成实验评估膀胱癌细胞增殖,流式细胞术检测膀胱癌细胞凋亡率与周期,划痕实验与transwell小室评估对膀胱癌细胞侵袭、迁移的影响。4.以meg3sirna与pcdna-meg3为处理因素,westernblot检测不同处理因素对膀胱癌细胞bcl-2、bax、cleavedcaspase3、cyclind1、vimentin、snail、e-cadherin蛋白表达的影响。【结果】1.35例病例中27例meg3低表达(77.14%);非肌层浸润性膀胱癌低表达的患者占总数的百分比为55.56%,肌层浸润性膀胱癌中低表达的患者占总数的百分比为94.12%;无淋巴结转移中的低表达患者所占的百分比为72.73%,有淋巴结转移中的低表达患者所占的百分数为75.00%;无远处转移中的低表达患者所占百分比为81.25%,有远处转移中的低表达患者所占百分比为66.67%。2.干扰meg3后膀胱癌细胞凋亡率下降,g0/g1期膀胱癌细胞数明显减少,膀胱癌细胞侵袭、迁移能力增强,增值率上升;过表达meg3后膀胱癌细胞凋亡率升高,g0/g1期膀胱癌细胞数明显增多,膀胱癌细胞侵袭、迁移能力下降,增值率下降。3.干扰meg3后能上调膀胱癌细胞bcl-2、cyclind1、vimentin、snail的表达水平,抑制bax、cleavedcaspase3、e-cadherin的表达。4.过表达meg3后能上调膀胱癌细胞bax、cleavedcaspase3、e-cadherin的表达水平,抑制bcl-2、cyclind1、vimentin、snail的表达。【结论】1.与毗邻正常黏膜相比,MEG3在癌组织中表达水平明显降低,并且非肌层浸润性膀胱癌中发生低表达的比例更低。此外,MEG3表达水平高低与膀胱癌细胞转移之间的联系没有特殊意义;2.MEG3诱导膀胱癌细胞EMT的发生,对人膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭有抑制效应,而增加了膀胱癌细胞的凋亡。3.MEG3可能介导Bax、Bcl-2、Cyclin D1、Cleaved caspase 3调控膀胱癌细胞的增殖与凋亡,通过Vimentin、Snail、E-cad的介导调节膀胱癌细胞的EMT、侵袭、迁移。