【摘 要】
：
目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是口腔中最常见的恶性疾病。目前针对OSCC的医治主要包括单纯的手术治疗或放疗,当发展到晚期后则需要手术和/或放疗结合化疗作为辅助治疗。然而,手术治疗会造成患者面部形态缺损和功能障碍,化疗会引起全身的毒副作用并产生耐药性,所以即使有很好的治疗效果,可患者仍对治疗后的美观和功能的行使很不满意。为了克服这些传统治疗
【基金项目】
：
国家自然科学基金（82001075）； 山西省自然科学基金（201901D111202）；
论文部分内容阅读
目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是口腔中最常见的恶性疾病。目前针对OSCC的医治主要包括单纯的手术治疗或放疗,当发展到晚期后则需要手术和/或放疗结合化疗作为辅助治疗。然而,手术治疗会造成患者面部形态缺损和功能障碍,化疗会引起全身的毒副作用并产生耐药性,所以即使有很好的治疗效果,可患者仍对治疗后的美观和功能的行使很不满意。为了克服这些传统治疗的局限性,光动力治疗（photodynamictherapy,PDT）逐步走入癌症治疗领域中。本课题旨在:1、使用一种近红外光激发的具有聚集诱导发光功能的光敏剂（photosensitizer,PS）,在体外细胞实验中,验证PS与OSCC细胞系的结合能力以及检测活性氧物质（Reactive oxygen species,ROS）的生成能力。2、在小鼠体内验证PS的生物安全性以及光动力治疗OSCC的效果,从而为推动PDT作为OSCC治疗的辅助疗法提供理论依据。方法:1、体外实验（1）培养实验组细胞系和对照组细胞系在体外细胞实验中,实验组选取人口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞系,对照组选取人口腔角质上皮（HOK）细胞系进行培养。（2）检测PS与细胞系的结合能力将PS与两种细胞系分别共孵育,在近红外显微镜下观察PS与细胞系的结合能力。（3）比较光与暗环境下,PS对细胞系的影响①用MTT法在光环境和暗环境下检测不同浓度的PS分别与SCC和HOK共孵育后在不同时间点下的细胞存活率。②在光环境与暗环境下,使用ROS探针2,7-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）检测光照后PS的ROS生成能力,使用碘化丙啶（PI）检测光照后PS对两种细胞的杀伤能力。2、体内实验（1）验证PS的生物安全性取20只小鼠分为对照组和实验组,对照组小鼠体内注入PBS,实验组小鼠体内注入PS,观察两组小鼠7天内的体重变化。7天后解剖取心、肝、脾、肺、肾做HE切片,取血进行生化检查,验证PS的生物安全性。（2）验证PS在体内的治疗效果取20只小鼠在背部建立皮下OSCC肿瘤模型,分4组进行治疗。A组瘤内注射PBS不加光照;B组瘤内注射PBS加光照;C组瘤内注射PS不加光照;D组瘤内注射PS加光照。每隔一天记载小鼠的肿瘤大小。15天后解剖肿瘤部位,对比4组肿瘤的治疗结果,每组各取两只小鼠的肝、肾、肿瘤进行HE切片。结果:1、体外实验PS与SCC共孵育后,近红外显微镜下明亮的荧光团显示PS能够有效结合SCC细胞。MTT法检测PS对SCC和HOK细胞的暗毒性和光毒性结果显示,在暗环境下,2.5、5、10、20、40μM浓度的PS与两种细胞共孵育20min后,均显示出较高的存活率。孵育4h后,40μM的PS显示出轻微毒性。在光环境下,不同浓度的PS与HOK结合后的细胞存活率仍然较高,而PS与SCC结合后的细胞存活率随着PS浓度升高而降低。在两种条件下使用DCFH-DA和PI试剂,施加光照时,荧光显微镜下明亮的绿色荧光和红色荧光分别显示了 PS的ROS生成能力和细胞杀伤效果;不施加光照时,荧光显微镜下无荧光显像,证明PS并没有生成ROS,且癌细胞也没有被杀死。2、体内实验在毒性实验中,实验组和对照组小鼠的体重变化、HE切片和血生化结果显示出两组小鼠无明显差别,显示了 PS良好的生物安全性。建立小鼠肿瘤模型后,在对小鼠进行光动力治疗的结果显示,瘤内注射PS结合光照组的小鼠肿瘤相对于其他三组的体积明显减小,且肿瘤组织HE切片结果显示相较于其他三组而言,实验组细胞周围有明显的坏死灶、癌细胞巢也有明显减少。结论:我们通过体外和体内实验初步验证了 PS在特定光照条件下可以产生ROS,进而达到对OSCC的抗癌作用。并其在体内实验中表现出优异的光稳定性、良好的生物相容性以及可忽略不计的暗毒性。本实验对PS的初步探索不仅为研发更有效和成熟的PS提供理论依据,同时为与传统治疗协同的临床应用提供了新的治疗方案。
其他文献
目的:1、基于言语性幻听认知模型,探索社会图式、言语性幻听信念与言语性幻听痛苦和应对方式的关系,并进行路径分析。2、制定虚拟化身心理疗法的本土化方案,探索虚拟化身心理治疗对言语性幻听的干预效果。方法:1、调查研究:在山西两所医院选择符合纳排标准的言语性幻听患者45例为研究对象,收集患者一般资料,采用精神症状评定量表幻听分量表、幻听相关信念量表、幻听影响力差异量表、社会影响力差异量表、声音比较量表、
目的:本研究以改善初产妇出院准备度的现实问题为主要关注点,整合“量+质”研究结果,深入分析初产妇出院准备的相关影响因素及护理需求,以此为指导依据形成母亲角色促成干预方案,并评价基于过渡理论的母亲角色促成干预对初产妇出院准备度的影响,以期为今后产科母婴健康出院管理提供参考依据。方法:本研究主要由三部分内容构成。第一部分:采用便利抽样法选取2020年7月～2021年7月在山西省某三甲综合医院初次分娩且
背景:重性抑郁障碍（Major depressive disorder,MDD）在全球范围内广泛流行,症状常常包括情绪低落、愉快感丧失、兴趣减退、体重反常增加或降低、精力下降等,严重者可能产生自杀倾向,位居精神类疾病前列。许多患者常常以躯体症状为主诉前来就诊。失眠症状是重性抑郁障碍患者较为常见的躯体症状,且常常作为首发症状出现,研究表明,大概92%的重性抑郁障碍患者存在睡眠障碍,其中85.2%的重
研究目的:面对海量、异构的医学数据资源,知识发现的出现为科研人员从海量数据中获取有效知识信息提供了可能。同时,“社交+医疗”的快速发展,社交媒体平台现已成为民众获取医疗讯息,健康知识传播的新途径。基于此,本文从社交媒体视角出发,对医药卫生领域进行核心主题识别和关联主题预测研究。通过借助相关方法,进而实现医药领域新兴关联主题的早发现早研究,进而拓宽科学研究视角,点明未来研究方向,对把握当前药物领域研
研究目的新冠肺炎疫情在全球的蔓延,引起了人们对健康责任这一主题的关注。目前,学者们对健康责任主体的划分研究较多,但缺乏对主体健康责任范围的界定以及对各主体协同工作的研究。本研究在健康中国建设的背景下,将定性与定量方法相结合,在了解国内外健康责任研究热点基础上,构建健康责任主体及其责任范围指标体系,为健康责任研究提供新内容新方法。研究对象国内外数据库收录的健康责任相关论文以及与健康相关的国家政策文件
目的:1.对两例非综合征型先天缺牙家系进行全外显子测序和Sanger测序验证,寻找其遗传学病因。并对基因突变位点进行保守性分析和蛋白三级结构预测,探讨突变基因的潜在致病机理。2.对六例非综合征型先天缺牙进行全外显子测序后发现存在EVC2新突变,致病性进行功能验证,为非综合型先天缺牙的致病机制深入研究提供一定理论基础。方法:1.对两例非综合征型先天缺牙患者进行临床检查、家系调查、影像学检查以及外周血
目的:糖尿病性牙周炎是目前人类常见的一种疾病,如何有效治疗糖尿病患者牙周组织炎症及加速牙周组织再生是临床上面临的一大医学难题。本研究将甲基丙烯酸酐（Methacrylic anhydride,MA）接枝到CS上得到低细胞毒性的光交联CS水凝胶（CM）,接着将CM水凝胶浸入单宁酸（Tannic acid,TA）溶液中形成CM/TA复合水凝胶,最后借N-羟基丁二酰亚胺（N-hydroxysuccini
目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是一种发病率较高,预后较差的恶性肿瘤,目前缺乏理想的治疗药物。葫芦素B（cucurbitacin B,Cu B）是一种四环三萜类小分子化合物,具有多种生物学功能,尤其抗肿瘤方面倍受关注。本研究通过网络药理学、体内动物实验和体外细胞实验,探讨Cu B对OSCC的作用和潜在机制。方法:第一部分:葫芦素B作用于口腔
目的:本研究的目的是探讨肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）和机械拉伸联合作用于MC3T3-E1细胞,对其成骨分化的影响以及该过程中核转录因子kappa B（nuclear factor-kappa B,NF-κB）信号通路的作用。方法:在MC3T3-E1细胞培养基内加入两种浓度的TNF-α（0.5和10 ng/m L）,使用Flexell 400
目的:中国的第四次口腔流行病学调查研究结论表明,我国55～64年龄段中,近67%的人患有不同程度的牙列缺损,在65～74年龄段中,牙列缺损的患者更高达82%。由于种植体具有不损伤邻牙、咀嚼效率高的特点,成为牙列缺损的首选修复方法。而骨质疏松患者的骨种植体结合率降低,影响了种植体的早期稳定,是种植体相对禁忌症。近年来,胰岛素对骨再生的作用引起关注,但胰岛素的体内活性时间只有5-10分钟。研究发现载胰