基于特异性转录因子Osterix探究桃红四物汤对大鼠创伤性股骨头坏死的影响

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yalaso_wind
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目的:基于Osterix这一特异性转录因子探究桃红四物汤对创伤性股骨头缺血性坏死模型大鼠的影响,通过实验,进一步明确桃红四物汤的功效及作用机制,进一步明确创伤性股骨头坏死的发病机制,为创伤性股骨头坏死的临床诊疗提供实验数据。方法:1.选取3个月龄SPF级健康SD大鼠35只作为实验对象,随机分为桃红四物汤高、中、低剂量组、模型组和正常组共5组,每组7只。2.将桃红四物汤高、中、低剂量组及模型组4组大鼠进行创伤性股骨头坏死疾病造模,在造模4周后从5组大鼠中各选取1只截取股骨头验证造模是否成功(以正常组为对照)。3.进行6周药物干预,每天2次,对高中低剂量组大鼠灌服高、中、低浓度的桃红四物汤,对造模组及正常组灌服等剂量生理盐水,6周后截取所有大鼠股骨头标本,大体观察后进行组织形态学、RT-q PCR、WB检测,并对数据进行统计分析。结果:1.大体形态观察:造模组大鼠的股骨头严重变形,表面软骨完全缺损;灌服桃红四物汤组股骨头形态普遍好于造模组,高剂量组标本接近正常股骨头形态。2.组织形态学检测:(1)组织形态:桃红四物汤高剂量组切片接近正常组切片,骨细胞量多质佳,分散排列均匀、致密,细胞形态饱满,胶原纤维丰富。模型组股骨头切片胶原纤维稀少;桃红四物汤中剂量组介于高剂量与模型组之间。(2)空骨陷窝率:桃红四物汤低剂量组(52.55±9.26)、桃红四物汤中剂量组(34.93±7.72)、桃红四物汤高剂量组(21.25±5.89)、模型组(44.63±4.50)、正常组(21.38±5.6)。组间比较桃红四物汤高剂量组与正常组无明显差异(P>0.05);其余各组间两两比较均存在差异(P<0.05)。3.RT-q PCR检测Osterix相对基因表达水平:各组股骨头组织的Osterix相对表达量存在差异(P<0.05),表达水平由高到低分别是正常组、桃红四物汤高剂量组、桃红四物汤中剂量组、桃红四物汤低剂量组、模型组,两两比较均存在差异性(P<0.05)。4 WB检测Osterix相对蛋白表达水平:股骨头组织的Osterix相对表达量存在差异(P<0.05),表达水平由高到低为:正常组、桃红四物汤高剂量、桃红四物汤中剂量、桃红四物汤低剂量组、模型组;两两比较桃红四物汤中、高剂量组与正常组三组水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:桃红四物汤可以上调创伤性股骨头坏死模型大鼠中特异性转录因子Osterix的表达;桃红四物汤能够增强坏死股骨头的骨细胞活性,促进骨与软骨修复,防止股骨头塌陷变形,增强髋关节的稳定性;临床上治疗创伤性股骨头坏死时,桃红四物汤饮片的应用剂量应酌情高于80g(煎服,一日早晚分服)。
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