根瘤菌菌剂研究

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选取豌豆根瘤菌三叶草生物型(Rhizobium leguminosarum bv. trifolii)TA1和华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)7653R作为供试菌,测定了根瘤菌在YMA、BSE、TY、SM、PA和Alrarez mannital medium(AMM)等六种培养基中生长的OD值曲线。结果表明:供试菌在YMA和BSE上生长较快,在PA中几乎不生长,TA1在AMM中几乎不生长,但7653R在该配方中有明显生长且快于SM。供试菌虽然在BSE中生长速度最快,但配制BSE的步骤较为复杂,并需要大量豆芽,培养基的质量常取决于豆芽的优劣。相比之下YMA配制方便,质量也易于控制,是工业生产根瘤菌剂的合适培养基。 本研究测定了供试菌在YMA中的生长曲线和相应的OD值曲线,并通过作图比较了两种曲线的相互关系。在YMA中生长时,7653R的代时为6.6小时;TA1为2.9小时。在此基础上制备了供试菌固体和浓缩液体菌剂,并比较测定了根瘤菌在供试菌剂中经不同保存时间之后的活菌数。 供试固体菌剂分别以草炭、蛭石和珍珠岩为载体,在测定载体相关物理化学性质的基础上,通过对载体进行含水量和pH值的预处理,加入适量根瘤菌培养液之后制成固体菌剂。比较测定了根瘤菌在3种供试固体菌剂中于室温下保藏的存活率,结果表明:在武汉3月到9月的测定时间内,草炭菌剂的存活率最高、珍珠岩菌剂次之、蛭石菌剂最低。两供试菌的活菌数一般在30天内呈增长趋势,在以后五个月的存放中各供试固体菌剂的活菌数均逐渐回落。其中7653R在草炭剂型中的最高活菌数可达37.0亿/克,TA1在蛭石剂型中可达7.0亿/克。供试菌在草炭剂型中的活菌数下降均较蛭石和珍珠岩剂型慢。 本研究还制备了浓缩液体菌剂,并测定了其在4℃冰箱中保存的活菌数。结果表明:虽然7653R比TA1有更高的起始菌数,但两种供试菌在浓缩液体剂型中的活菌数均随着保藏时间的延长而不断减少,并在真空和N2中的保藏效果有明显的差异:TA1在真空中保藏较好,而7653R在N2中较好。TA1在N2中的活菌数下降较快,一个月后已降至起始菌数的1/10左右。 为提高浓缩液体菌剂的保藏效果,本研究比较测定了苯甲酸钠、对羟基苯甲酸和对羟基苯甲酸乙脂等三种抑菌剂的最佳使用浓度。结果表明:三种供试抑菌剂均只在其最佳浓度时才对根瘤菌有最好的保藏效果,浓度偏高和偏低时效果下
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