油菜抗根肿病KASP标记开发及病原菌快速检测技术的研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lalalalalaaa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根肿病是严重危害十字花科作物的世界性土传病害,该病害可对白菜、甘蓝、油菜等多种十字花科植物造成严重危害,主要表现为主根或侧根膨大,呈大小不一形状不规则的肿瘤,严重影响植物的生长发育。近年来,随着农业机械化程度的提高,根肿病在我国的扩散呈加速态势,从以前病害集中在四川、云南等地,现已开始扩散到长江中下游地区,我国的油菜生产面临着根肿病危害的严重考验。本研究利用qPCR技术开发了一套定量检测土壤中根肿病菌含量的技术,利用该方法能够对土壤根肿病的发生风险进行评估。另外,本研究开发了一个新型KASP标记,利用该标记能够准确的鉴别根肿病抗、感材料,利用该标记可有效提高油菜育种效率。研究主要结果如下:(1)构建标准重组质粒制作标准曲线,建立根肿病菌qPCR检测体系,得到拷贝数与Ct值之间的线性关系表达式:y=-3.4669x+42.921,决定系数R~2=0.992,标准曲线扩增效率E=94.3%。用该体系对油菜种植地采集到的未知土样进行分析,计算得到发病田块根肿病病菌孢子含量在8.2×10~3~10~4个孢子/克土壤,未发病田块病菌孢子含量在10~2~10~3个孢子/克土壤。(2)对根肿病抗病基因Crr1与其在甘蓝型油菜中的同源基因LOC103834349进行克隆测序,发现两序列间有SNP位点存在,针对第1486-1487上的非同义突变位点,开发了一套精准检测抗根肿病基因型的KASP分子标记。利用该标记对771个样本进行了检测,其中315个单株为纯合感病基因型GG,322个单株为纯合抗病基因型AA,134个单株为杂合抗病基因型GA,与田间根肿病抗感病表型鉴定结果一致。其中编号2033的F2群体的125株材料中纯合抗性基因型AA 30株,纯合感病基因型GG 33株,杂合基因型GA 62株。经(?)检测,抗病材料与感病材料符合3:1比例,抗病纯合基因型、抗病杂合基因型与感病纯合基因型的比值符合1:2:1理论值。研究表明该KASP标记,可以在短时间内对大量材料进行快速可靠的分析鉴定,能有效提高油菜根肿病抗性育种效率,同时该标记可作为一个新的高通量、高选择效率的分子标记,能快速准确筛选抗根肿病材料。
其他文献
目的:本论文的研究目的是基于建立裸鼠原位移植瘤模型,验证扶正祛毒方在体内治疗骨肉瘤的有效性,用智能型纳米胶束载体包裹扶正祛毒方中抑制骨肉瘤生长的有效单体雷公藤甲素(TP),进一步探讨负载TP的纳米胶束(TP-TPBC-PEG)与光动力疗法协同治疗骨肉瘤的作用。方法:1.通过体内实验验证扶正祛毒方抗骨肉瘤的作用建立原位异种移植骨肉瘤裸鼠模型,观察扶正祛毒方对骨肉瘤体积和重量、裸鼠肝脾肾脏器指数的影响
学位
目的:高血压是心血管疾病的首位危险因素,其机制复杂,现代医学抗高血压治疗面临诸多瓶颈。中药复方多靶点、多途径的效应模式具有一定的临床应用价值,明确其血压调节效应及机制有助于科学合理的临床应用。高血压相关脑肠轴改变为从整体理解高血压病理形成及药物作用机制的研究提供了新的切入点。高血压相关脑肠轴改变包括大脑自主神经调控中心下丘脑室旁核(PVN区)小胶质细胞激活导致交感神经兴奋性输出增加,促进血压升高;
学位
目的:“一药多基原”中药的质量与生物效应等同性研究是中药标准化所面临的传统难题。仅以品种本身化学成分和药效差异难以全面揭示其内在品质和药性不同的科学内涵。本研究以白芍和赤芍(北赤芍和川赤芍)为研究对象,以经方黄芩汤为载体,将多基原芍药分别放入方剂中同步对比研究,发现与鉴定引起药效差异的化学成分(群),阐明白芍和赤芍的药效物质基础,为黄芩汤中芍药基原确定,也为其他“同属多基原”中药的质量和生物效应等
学位
目的:研究雷公藤甲素(TL)对C57BL/6小鼠睾丸生精细胞的毒性作用。方法:8周龄健康雄性C57BL/6小鼠,每天经口灌胃给予0.125、0.25和0.5 mg·kg-1的TL,分别于给药第3、7、11和15天解剖,摘取双侧睾丸。左侧进行苏木素-伊红(HE)、γ-H2AX和Lin28a免疫组化染色,右侧进行实时荧光定量PCR分析。结果:1.HE染色结果提示,TL给药第11天睾丸生精细胞损伤具有最
学位
目的:IFI16(interferoninducible protein16,IFI16)是参与天然免疫的一类重要的蛋白分子,其介导的信号通路可以活化免疫细胞,促进I型干扰素的分泌,发挥抗病毒作用。我们实验室团队的多项研究显示,补肾方可以通过多环节的免疫调控,尤其是改善慢性乙型肝炎(CHB)患者树突状细胞(DCs)免疫缺陷,促进干扰素等细胞因子的分泌,调节适应性免疫应答发挥抑制HBV病毒效应。本研
学位
目的:收集并梳理海派中医丁氏内科严苍山流派医家及四代代表性传承人丁甘仁、严苍山、严世芸、潘华信、徐燕的胸痹病医案,总结其治疗胸痹病的特色方法,通过探讨每位医家治疗胸痹的经验,初步总结丁氏内科严苍山流派治疗胸痹的诊疗经验和传承规律。方法:通过对医案的梳理、医案筛选与录入、利用统计学进行数据处理、最后进行结果的分析,总结规律。收集整理了丁甘仁医案9则,严世芸医案200则,潘华信医案125则,徐燕医案2
学位
目的:本课题旨在观察健脾清化方联合西医治疗慢性肾衰竭(Chronic kidney-disease,CKD)对患者微炎症状态的影响,阐明CKD患者免疫炎症损伤与中医病症相关性、评价健脾清化方干预CKD3期脾虚湿热型患者微炎症状态及免疫功能的临床疗效,为研制中医药防治CKD的新方提供临床依据。方法:本研究以纳入符合CKD3期中医辨证分型属脾肾气虚兼有湿热证的患者为研究对象,采用随机对照方法,分为对照
学位
马铃薯晚疫病由致病疫霉引起,导致马铃薯茎叶死亡和块茎腐烂的一种毁灭性卵菌病害,是制约马铃薯产量的重要因素。在目前马铃薯晚疫病的防治中,抗药性的发展是一个严峻的问题,农药残留和环境污染现象也较为严重。为了绿色防控马铃薯晚疫病,降低马铃薯晚疫病的抗药性,实现化学农药的减量增效,采用非化学农药或环境友好剂型尤为必要。基于此,本文研究筛选了植物源活性成分,通过与多作用机制的农药复配,筛选最佳复配组合及配比
学位
目的:1.研究拇外翻对儿童步态模式的影响。2.探究基于中医筋骨及阴阳平衡理论制定的肌内效贴结合运动疗法对儿童拇外翻的干预效果。方法:1.本研究选取上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院步态与运动发育异常门诊的3-6岁及7-12岁拇外翻儿童各50例作为拇外翻组。通过个体配对,选取步态与运动分析中心正常儿童步态数据库中的3-6岁及7-12岁正常儿童各50例作为正常组。运用运动捕捉系统采集两组儿童步行时的
学位
我国黄瓜种植面积位居世界第一,在农业经济发展中占据重要地位。目前我国的黄瓜采摘作业基本依靠人工完成,人工采摘劳动强度大、生产效率低、生产成本高。因此研发具有识别和定位功能的采摘机器人代替人工采摘具有重要的现实意义。本课题针对自然环境下黄瓜采摘机器人的应用需求,提出了一种基于深度学习的黄瓜目标检测与采摘定位方法,具体研究内容如下:(1)基于黄瓜目标识别的图像处理方法研究。通过实地调查黄瓜种植园的布局
学位