目的:1.研究西府海棠果实中对酪氨酸酶起抑制/激活作用的活性成分,并借助成分敲出法和UPLC-MS/MS技术对西府海棠果实与酪氨酸酶功效关联成分进行结构鉴定;在此基础上,考察活性化合物对酪氨酸酶催化反应的动力学模型,并借助分子对接技术预测化合物和酪氨酸酶的活性结合位点。2.建立大鼠肝微粒体体外探针试验,研究西府海棠果实中根皮苷、对香豆酸、槲皮素-3-O-鼠李糖苷和香豆酸-4-O-葡萄糖苷对CYP1A2、CYP3A4、CYP2E1和CYP2C11酶活性的影响,预测化合物与其他药物联用时可能发生的代谢性药物-药物相互作用。方法:1.采用HPLC法建立20批西府海棠果实指纹图谱,结合聚类分析（HCA）和主成分分析（PCA）对样品进行评价;采用酪氨酸酶活力测定法比较不同批次西府海棠果实对酪氨酸酶活性的影响,通过PLSA法建立谱效关系,确定西府海棠果实中对酪氨酸酶起抑制/激活作用的活性成分。利用HPLC敲出目标成分,UPLC-MS/MS法对“敲出”的目标成分进行结构鉴定,结合分子对接技术预测活性结合位点,并进行酪氨酸酶活性验证。2.通过HPLC法测定特异性探针代谢物的含量,计算半数抑制浓度IC50值;进一步采用酶促反应动力学确定其抑制作用类型,并计算相应的抑制常数。结果:1.20批西府海棠果实HPLC指纹图谱共确定12个共有峰,除S3、S6和S9批次样品的相似度为0.778、0.868和0.870外,其余各批次样品的相似度均在0.930～0.978范围内。HCA结果与PCA结果基本一致,结果显示全部样品被聚为3类。在浓度0.5 g/m L时,西府海棠果实对酪氨酸酶活性的抑制作用效果最好;PLSA分析结果显示,共有峰P2、P3、P5和P6对酪氨酸酶活性的抑制作用呈正相关（R＞0.1）;共有峰P8和P9对酪氨酸酶活性的抑制作用呈负相关（R＜-0.1）。UPLC-MS/MS鉴定P2、P6、P8、P10、P11和P12分别为对香豆酸、阿魏酸-酰基葡萄糖苷、香豆酸-4-O-葡萄糖苷、根皮素-2’-木糖葡萄糖苷、根皮苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷。酪氨酸酶动力学试验结果表明:对香豆酸（P2）和当根皮苷（P11）浓度大于0.50 m M时,对酪氨酸酶为竞争性抑制类型,其中根皮苷浓度小于0.25 m M时,为混合型抑制类型。香豆酸-4-O-葡萄糖苷（P8）、槲皮素-3-O-鼠李糖苷（P12）分别在0.1～9 m M、0.3～11 m M的浓度范围内主要表现为非竞争性激活类型和混合型激活类型。酪氨酸酶分子对接结果表明:对香豆酸（P2）、香豆酸-4-O-葡萄糖苷（P8）、根皮苷（P11）、槲皮素-3-O-鼠李糖苷（P12）均位于酪氨酸酶的口袋活性中心,与酪氨酸酶的氨基酸残基以氢键结合,并与酪氨酸酶存在疏水作用,共同维持复合物的结构。2.根皮苷、对香豆酸、槲皮素-3-O-鼠李糖苷和香豆酸-4-O-葡萄糖苷对CYP2E1和CYP2C11酶活性无明显抑制作用。对香豆酸、根皮苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷对大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性具有微弱抑制作用,属于竞争性抑制类型,抑制常数分别为10.56μM、30.79μM和40.29μM（Ki＞10μM）。香豆酸-4-O-葡萄糖苷对大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性具有中等强度的抑制作用,属于反竞争性抑制类型,抑制常数为5.56μM。对香豆酸对大鼠肝微粒体CYP1A2酶活性具有微弱的抑制作用,属于竞争性抑制类型,抑制常数为25.20μM（Ki＞10μM）。香豆酸-4-O-葡萄糖苷对大鼠肝微粒体CYP1A2酶为反竞争性抑制类型,抑制常数为19.91μM（Ki＞10μM）,对CYP1A2酶表现出弱抑制作用。结论:1.对香豆酸（P2）和当根皮苷（P11）浓度大于0.50 m M时,对酪氨酸酶具有竞争性抑制作用,其中根皮苷浓度小于0.25 m M时,具有混合型抑制作用。香豆酸-4-O-葡萄糖苷（P8）、槲皮素-3-O-鼠李糖苷（P12）分别在0.1～9 m M、0.3～11 m M的浓度范围内主要表现为非竞争性激活类型、混合型激活类型。2.对香豆酸、根皮苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷和香豆酸-4-O-葡萄糖苷对CYP2E1和CYP2C11的酶活性无明显抑制作用。对香豆酸、根皮苷和槲皮素-3-O-鼠李糖苷对CYP3A4酶活性具有微弱抑制作用。香豆酸-4-O-葡萄糖苷对CYP3A4具有中等强度的抑制作用。对香豆酸对CYP1A2酶活性具有微弱的抑制作用。香豆酸-4-O-葡萄糖苷对CYP1A2具有弱抑制作用。该研究为化合物在临床与其他药物联合应用时,避免药物-药物相互作用,从而为用药安全性提供理论依据。