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目的:糖尿病大血管病变发病率高、病死率高,冠心病是最常见的大血管并发症之一,预防及早诊、早治极为重要,但目前临床上尚无用于早期筛查和诊断的血清生化指标,因此,寻找2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并冠心病的血清生物标志物在临床上具有重大意义。本研究前期运用蛋白质组学相对定量技术筛选出T2DM合并冠心病有诊断价值的差异蛋白质。本研究从中选择5种差异蛋白质应用酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法对同位素相对标记与绝对定量(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation,i TRAQ)结果进一步验证,并在另一组独立样本群中对上述差异蛋白质行ELISA再次验证,从而明确血清中与T2DM合并亚临床动脉粥样硬化或冠心病相关的血清生物标志物。方法:1.分别于2014年1月~2014年12月(队列1)、2016年1月~2016年12月(队列2)选择于大连医科大学附属第一医院住院的T2DM患者,根据其大血管病变程度,分别入组T2DM不合并大血管病变组(Diabetes&non-macrovascular group,DNM)、T2DM合并亚临床大血管病变组(Diabetes&subclinical macrovascular group,DSM)及T2DM合并冠心病组(Diabetes&coronary artery disease group,DMC),其中队列1(DNM30例、DSM30例、DMC30例),队列2(DNM17例,DSM48例,DMC51例)为研究对象。收集研究对象血清,记录一般临床资料,进行统计学分析。2.从前期蛋白质组学相对定量技术筛选出的对T2DM合并冠心病有诊断意义的差异蛋白质中选取5个差异蛋白质,分别为补体7(Complement 7,C7)、胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1,IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(Insulin-like growth binding protein 3,IGFBP-3)、α2-巨球蛋白(Alpha2 macroglobulin,A2M)及烯醇化酶1(Alpha-enolase,ENO1),在各组中应用ELISA方法进行定量检测。结果:1.T2DM发生亚临床大血管病变的危险因素为年龄,OR值为1.250。T2DM发生冠心病的危险因素为年龄,OR值为1.420。2.ELISA结果显示,DSM比DNM,IGF-1明显降低(72.25±21.52ng/ml vs.112.45±36.34ng/ml,P=0.001)差异显著,A2M明显升高(1157.40±694.06μg/ml vs.373.78±161.30μg/ml,P=0.003)差异显著,C7明显升高(102.082±28.20μg/ml vs.84.86±19.20μg/ml,P=0.022)差异显著,IGFBP-3明显降低(1916.36±992.80ng/ml vs.2828.06±901.03 ng/ml,P=0.028)差异显著,且趋势与i TRAQ结果一致;ENO1降低(128.63±36.34μg/ml vs.134.68±49.70μg/ml,P=0.567)差异不显著,但趋势与i TRAQ结果一致。DMC比DNM,IGF-1明显降低(79.94±19.66ng/ml vs.112.45±36.34ng/ml,P=0.009)差异显著,IGFBP-3明显降低(1732.14±442.68ng/ml vs.2828.06±901.03ng/ml,P=0.026)差异显著,C7明显升高(101.48±17.38μg/ml vs.84.86±19.20μg/ml,P=0.02)差异显著,且趋势与i TRAQ结果一致;A2M升高(985.15±467.95μg/ml vs.373.78±161.30μg/ml,P=0.061)差异不显著,ENO1降低(113.84±33.90μg/ml vs.134.68±49.70μg/ml,P=0.418)差异不显著,但趋势均与i TRAQ结果一致。3.受试者工作特征曲线结果表明,IGF-1、A2M及C7用于诊断T2DM合并亚临床大血管病变有显著意义,且A2M的诊断效能优于IGF-1和C7。IGF-1、C7用于诊断T2DM合并冠心病有显著意义,且C7的诊断效能优于IGF-1。结论:1.A2M、IGF-1及C7可能作为T2DM合并亚临床大血管病变的诊断指标,其中A2M作为诊断指标效能最强。2.IGF-1、C7可能作为T2DM合并冠心病的诊断指标,其中C7作为诊断指标效能最强。