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背景:肝癌是全球第六大常见癌症,2020年全球新发病例超过900,000例,死亡率高居癌症致死率第三位。肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）占所有原发性肝脏恶性肿瘤的90%,由于其预后不良死亡率逐年升高,肝细胞癌的发生已经成为一个越来越被重视的国际健康问题。肝细胞癌的预后差、术后生存率低且复发率高、死亡率偏高的主要原因在于其易发生转移。癌细胞的转移、扩散使得癌症在临床上无法达到根治。肿瘤细胞糖代谢的异常为肿瘤转移创造了良好的条件,其显著特征是葡萄糖摄取利用的增加和乳酸的积累量增加。通过改变肝癌细胞的糖代谢对于肝癌治疗有重要意义。表皮调节素（Epiregulin,EREG）是一种表皮生长因子相关分子,EREG异常表达与多种癌症相关。本组前期研究发现:EREG过表达抑制肝癌HCCLM3和Huh7细胞体外迁移和侵袭,而敲降EREG促进细胞迁移和侵袭。研究EREG与肝癌糖代谢的相关性,有助于为肝癌基础研究与治疗提供线索。糖代谢的改变是肿瘤细胞代谢重编程中的重要一环,其分子调控机制并不明确,基于代谢紊乱与肿瘤发生密切的相关性。EREG对肝癌细胞糖代谢的调控作用未见报道,本文研究了其对肝癌细胞糖代谢的调控,并明确了EREG通过PI3K/AKT信号通路影响肿瘤细胞的糖代谢。目的:1.明确EREG水平变化对HCCLM3和Huh7细胞糖代谢的影响;2.检测EREG水平变化对HCCLM3和Huh7细胞糖代谢相关分子HKII、GLUT1、GSK3β的影响;3.探讨EREG调控HCCLM3、Huh7细胞糖代谢的分子机制。方法:1.qRT-PCR法检测EREG在HCCLM3和Huh7中转染效率;2.WB法检测EREG在HCCLM3和Huh7中转染效率;3.GOD-POD法检测EREG水平变化对HCCLM3和Huh7葡萄糖摄取影响;4.乳酸脱氢酶法检测EREG水平变化对HCCLM3和Huh7乳酸生成影响;5.PAS染色法检测EREG水平变化对HCCLM3和Huh7糖原合成的影响;6.WB法检测EREG水平变化对HCCLM3和Huh7细胞PI3K通路,及糖代谢相关分子HKⅡ,GLUT1和GSK3β表达的影响;7.用LY294002抑制PI3K通路,GOD-POD法检测HCCLM3和Huh7葡萄糖摄取;乳酸脱氢酶法检测HCCLM3和Huh7乳酸生成;PAS染色法检测HCCLM3和Huh7糖原合成;WB法检测HCCLM3和Huh7糖代谢相关分子水平变化,以及PI3K通路分子水平变化。结果:1.在m RNA水平检测EREG:EREG稳转细胞株HCCLM3-PCDH-EREG中EREG的表达水平升高138%（P=0.0334）,瞬时转染EREG过表达载体使Huh7细胞中EREG m RNA水平显著升高;si RNA转染使HCCLM3和Huh7细胞中EREG的表达分别降低60.9%（P=0.0001）和69.2%（P=0.0011）。2.在蛋白水平检测EREG:EREG稳转细胞株HCCLM3-PCDH-EREG中EREG表达水平升高70.0%（P=0.0008）,瞬时转染EREG过表达载体使Huh7细胞中EREG表达水平升高57.7%（P=0.0021）,;si RNA转染使HCCLM3和Huh7细胞中EREG的表达分别降低47.7%（P=0.0043）和47.0%（P=0.0005）。3.在瞬时敲降EREG 24h后,HCCLM3和Huh7细胞葡萄糖摄取分别增加27.3%（P=0.0003）和32.4%（P=0.0007）,乳酸生成量分别增加35.0%（P=0.0002）和40.5%（P=0.0005）;糖原合成反应呈阳性,糖原呈紫红色颗粒状,弥散分布于肝癌细胞胞质内,糖原含量丰富、颗粒清楚、分布均匀,糖原的合成量增加。4.在过表达EREG后,HCCLM3和Huh7细胞葡萄糖摄取分别减少18.1%（P=0.0068）和30.6%（P=0.0013）,乳酸生成量分别减少16.5%（P=0.0004）和23.3%（P=0.0007）;糖原合成反应较弱,肝癌细胞胞质中糖原含量少、颗粒小且不清晰,糖原的合成量减少。5.在HCCLM3和Huh7细胞中敲降EREG,PI3K表达分别升高78.0%（P=0.0161）和57.0%（P=0.0156）,磷酸化蛋白激酶B（p-AKT,phosphorylated protein kinase B）表达分别升高76.7%（P=0.0045）和77.0%（P=0.0180）,己糖激酶II（hexokinase II,HKII）分别升高67.7%（P=0.0332）和58.0%（P=0.0048）,葡萄糖转运体1（glucose transporters 1,GLUT1）表达分别升高80.3%（P=0.0068）和35.3%（P=0.0169）,糖原合成酶激酶3β（glycogen syntheses kinase3β,GSK3β）表达分别降低35.7%（P=0.0030）和48.3%（P=0.0057）。6.在HCCLM3和Huh7中过表达EREG,PI3K表达分别降低54.3%（P=0.0132）和38.3%（P=0.0046）,p-AKT表达分别降低55.3%（P=0.0004）和45.3%（P=0.0009）,HKII表达分别降低51.7%（P=0.0154）和43.7%（P=0.0006）,GLUT1表达分别降低50.3%（P=0.0169）和50.7%（P=0.0452）,GSK3β表达分别升高41.7%（P=0.0234）和54.3%（P=0.0097）。7.抑制PI3K后,EREG敲降HCCLM3和Huh7细胞24 h葡萄糖的摄取分别减少24.2%（P=0.0029）和35.9%（P=0.0026）;乳酸生成在24 h分别减少25.4%（P=0.0006）和28.9%（P=0.0002）、PAS阳性反应较弱,糖原颗粒浅且少,分布不均匀,糖原含量减少;PI3K表达水平分别降低52.7%（P=0.0007）和47.7%（P=0.0111）,p-AKT表达水平分别降低38.0%（P=0.0006）和50.1%（P=0.0031）,HKII表达水平分别降低44.7%（P=0.0021）和48.7%（P=0.0009）,GLUT1表达水平分别降低49.3%（P=0.0021）和40.7%（P=0.0052）,GSK3β表达水平分别增加51.0%（P=0.0106）和66.0%（P=0.0007）。结论:1.EREG敲降促进HCCLM3和Huh7葡萄糖摄取,并促进乳酸的生成和糖原的合成;2.EREG过表达抑制HCCLM3和Huh7葡萄糖摄取,并抑制乳酸的生成和糖原的合成;3.EREG通过PI3K/AKT通路调控HCCLM3和Huh7糖代谢。