【摘 要】
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由致病性大肠杆菌所引起的犊牛腹泻是犊牛最为常见的疾病之一,如果不及时治疗或合理用药,严重时会引起犊牛死亡,将给养牛业带来巨大的经济损失。为更好地了解保定地区大肠杆菌性犊牛腹泻的流行情况,本试验对该地区规模化牛场进行有针对性的流行病学调查,在对病原体进行分离鉴定的基础上,进行了血清型鉴定、毒力基因检测、小鼠致病性试验、体外药物敏感性试验及耐药基因检测等试验,以便为该病的预防与治疗提供依据。本试验对保
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由致病性大肠杆菌所引起的犊牛腹泻是犊牛最为常见的疾病之一,如果不及时治疗或合理用药,严重时会引起犊牛死亡,将给养牛业带来巨大的经济损失。为更好地了解保定地区大肠杆菌性犊牛腹泻的流行情况,本试验对该地区规模化牛场进行有针对性的流行病学调查,在对病原体进行分离鉴定的基础上,进行了血清型鉴定、毒力基因检测、小鼠致病性试验、体外药物敏感性试验及耐药基因检测等试验,以便为该病的预防与治疗提供依据。本试验对保定地区犊牛腹泻的流行情况进行了调查,发现保定地区犊牛腹泻病总发病率为33.42%,犊牛腹泻病在全年均有发生,10~12月和1~4月为发病高峰期。15日龄以内的犊牛腹泻病发病率最高为35.48%,发病率随着日龄的增加而呈现下降趋势。将采集到的108份样品,通过细菌的分离培养和生化鉴定,初步分离到75株疑似大肠杆菌菌株,对疑似菌株进行16S rDNA鉴定,结果显示全部为大肠杆菌,分离率为69.44%。小鼠进行致病性试验结果显示,致死率为88%。剖检死亡小鼠心、肝、脾、肺、肾、肠等组织出现不同程度的病变。通过脏器细菌回归检测,阳性率为100%。通过组织病理学变化,各组织细胞呈现不同程度的变性、坏死,小肠绒毛断裂,少量炎性细胞浸润,细胞核溶解,由此可见不同的分离菌株的毒力可能不同。对所分离出的致病性大肠杆菌进行O血清型进行鉴定,75株致病性大肠杆菌分离株中定型了 58株,共覆盖了 6种血清型,分别为O152、O157、O167、O100、O19和O39,其中O157和O152为该地区的优势血清型。通过对75株犊牛腹泻大肠杆菌分离株HPI核心区irp2的检测,共有49株HPI 阳性,阳性率为65.33%(49/75)。49株犊牛腹泻大肠杆菌HPI阳性菌株中,6种主要毒力因子的阳性率各不同:其中irp3阳性率最高,为38.78%(19/75);ybtA、fyuA、irp5、irp8 和asn-tRNA-intB基因阳性率分别为 14.29%(7/49)、16.33%(8/49)、26.53%(13/49)、22.45%(11/49)和 16.33%(8/49)。药敏试验表明,75株分离菌对强力霉素、复方新诺明耐药率最高,达88%;对氨苄西林、链霉素、环丙沙星的耐药率分别为76%、72%、56%。对新霉素的敏感性最高,对多粘菌素B、头孢曲松的敏感性次之。且所有菌株均存在多重耐药现象,其中6重耐药占比最多,为38%,其他多重耐药比例在30%以内。通过PCR方法对11种耐药基因进行检测,结果表明,ermB和tetB基因的检出率最高(100%),blaTEM、aaC2、aaC4和qnrB基因的检出率分别为72%、64%、68%、60%,没有检测到四环素类tetA和磺胺类sul2基因。治疗试验表明,新霉素与白头翁散结合治疗大肠杆菌所致犊牛腹泻的效果最佳。综上所述,本研究调查了保定地区大肠杆菌性犊牛腹泻的发病情况及发病规律,确定了该地区的优势血清型和分离菌株的毒力,筛选出了敏感抗生素和耐药基因,发现最敏感抗生素新霉素和中药白头翁散治疗效果最佳,可在临床上广泛地推广应用。
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