MELK在皮肤T细胞淋巴瘤中的表达及其靶向药物OTSSP167对皮肤T细胞淋巴瘤生物学行为作用的研究

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:johnchen1001
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皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)是一组异质性明显的、原发于皮肤的非霍奇金淋巴瘤,最常见的是蕈样肉芽肿(MF)和Sézary综合征。MF进展缓慢,病程因人而异:部分患者仅表现为斑片、斑块,少数患者可出现红皮病或肿瘤性病变,此时病情进展较快,更易出现皮肤外器官受累,预后较差。Sézary综合征侵袭性强,预后较差,5年生存率为10%-15%。母体胚胎亮氨酸拉链激酶(maternal embryonic leucine zipper kinase,MELK)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族的非典型成员,正常表达于胚胎形成过程中的上皮间质转化(EMT)区域,可参与干细胞分化、细胞周期调控、细胞增殖、凋亡、侵袭与转移等功能,在包括弥漫大B细胞淋巴瘤、NK/T细胞淋巴瘤、肺癌、乳腺癌等多种肿瘤中高表达。本研究采用qPCR法检测健康人外周血单个核细胞(PBMC)及皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞株中MELK的mRNA表达情况。并观察使用MELK抑制剂OTSSP167前后CTCL细胞株生物学行为的改变,评估该药物的疗效。第一部分:MELK在CTCL细胞株及外周血单个核细胞中的表达及意义目的探究MELK在CTCL肿瘤细胞株及健康人外周血单个核细胞(PBMC)mRNA的表达情况方法(1)提取6例健康人PBMC及4株CTCL肿瘤细胞RNA,应用qPCR检测MELK mRNA表达水平,同时采用Graphpad技术及t检验对结果进行统计分析。结果MELK在CTCL细胞株中mRNA表达水平较健康人PBMC明显升高(P<0.01)。结论MELK的mRNA水平在CTCL细胞株呈异常高表达第二部分:应用MELK抑制剂OTSSP167对CTCL细胞生物学行为的影响目的探究MELK靶向药物OTSSP167对CTCL肿瘤细胞株Myla与Hut78增殖、凋亡等生物学行为的影响。方法(1)使用不同浓度的OTSSP167作用于Myla及Hut78细胞株,培养48小时后,通过WB检测不同浓度下肿瘤细胞中的MELK表达情况。(2)分别采用CCK-8、流式细胞仪比较不同浓度下肿瘤细胞在增殖、凋亡等方面的变化。结果(1)与对照组相比,OTSSP167可抑制肿瘤细胞中MELK的表达,且抑制能力呈浓度梯度正相关(P<0.05)。(2)与对照组相比,OTSSP167作用后,CTCL细胞增殖活性呈浓度依赖性明显降低,凋亡细胞明显增加。结论OTSSP167可抑制Myla及Hut78细胞增殖,促进其凋亡。
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