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本文以开发利用绞股蓝资源、获得纯度较高的皂苷及确定绞股蓝的最佳采收期和采收部位为主要目的,对不同时期、不同部位和不同产地的绞股蓝中皂苷类化合物的含量变化进行测定,并对绞股蓝中皂苷类化合物进行了提取,采用树脂法和膜分离法对皂苷进行了分离纯化。初步摸索了绞股蓝中皂苷的最佳提取工艺,以及树脂法和膜分离法的最佳工艺参数,为工业化生产选择不同的纯化方法提供了一定的参照和相应的工艺参数,为开发利用绞股蓝皂苷资源提供了科学依据。一、HPLC法测定不同绞股蓝皂苷的含量:本文首次采用HPLC法对不同时间、不同产地、不同部位的绞股蓝四种单体皂苷同时进行了分析研究,结果表明同一时间绞股蓝叶中含量最高,根最少;同一部位不同时间的皂苷含量不同,呈现低→高→低的变化趋势,8月份最高,5月份最低;不同产地的绞股蓝皂苷含量不同。因此,在采收时要注意根据皂苷含量的变化选择合适的采收部位和采收时间,以有效的保护绞股蓝资源。二、绞股蓝皂苷的提取工艺的研究:以绞股蓝皂苷的提取得率为指标,通过对水提取法、果胶酶提取法和纤维素酶提取法进行比较,并对影响水提取法的料液比、温度、时间和影响酶提取法的加酶量、提取温度、pH、时间进行了考察,最终确定水提取法的最佳工艺条件为:料液比1:30(体积比)、温度83℃、时间110min;果胶酶提取法的最佳工艺条件为:料液比1:30(体积比)、加酶量0.25%、提取温度50℃、pH3.6、时间106min;纤维素酶提取法的最佳工艺条件为:料液比1:30(体积比)、加酶量0.13%、提取温度58℃、pH5.9、时间112min。结果表明采用水提法皂苷提取得率最高,纤维素酶法提取率最低。三、树脂分离纯化皂苷的研究:1.通过比较不同型号的大孔吸附树脂对绞股蓝提取液中皂苷的吸附和解吸性能,确定了用XAD1600树脂进行绞股蓝皂苷的分离纯化,并优化出了吸附和解吸的最佳工艺条件。最佳吸附工艺条件为:吸附流速为1.5BV/h,上样液浓度为4.0mg/mL,NaCl浓度为4%;解吸条件为:先用水和30%的乙醇去除糖类和脂溶性成分等杂质,再用5BV的65%乙醇液解吸,收集65%乙醇解吸液。2.001×14.5脱盐树脂和D280脱色树脂的最佳工艺条件:脱盐的条件为样液流速6BV/h,树脂的脱盐处理量为6倍的柱体积;脱色的条件为样液流速6BV/h,温度40℃。脱盐树脂和脱色树脂的用量比为4:9。四、膜分离皂苷的研究:通过对100K、50K、30K、10K等不同截留分子量膜性能的筛选,试验选择先用100K膜对皂苷溶液进行过滤,收集透过液;再用30K膜对100K膜的透过液进行浓缩,收集截留液。100K膜最佳工艺条件为:压力20Psi,温度45℃,样液浓度2mg/mL;50K膜最佳工艺条件为:压力20Psi,温度35℃。并且通过对酸碱等不同清洗剂的比较试验选择膜清洗后膜通量恢复率最好的是磷酸和NaOH+NaClO溶液的复合液作为最佳清洗剂。本文对绞股蓝皂苷类化合物的提取分离方面进行了一系列的研究,建立了一套从采收——提取——分离纯化绞股蓝皂苷的方法,鉴于我国尤其是西南地区绞股蓝资源丰富,应该充分利用其资源优势,从化学成分、提取分离以及纯化进行研究,使其产品发挥更加重要的作用。