【摘 要】
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目的:组织工程血管（TEBV）在血管代替移植方面具有巨大的临床应用潜力,内皮化被认为是保障小口径组织工程血管长期畅通的关键。然而,在复杂的病理微环境中,内皮细胞（ECs）可经历内皮-间充质转化（End MT）,进而诱导病理性血管重塑,引起TEBV狭窄或堵塞。炎症细胞分泌的炎症因子和生长因子,如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、转化生长因子-β（TGF-β）等是在End M
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目的:组织工程血管（TEBV）在血管代替移植方面具有巨大的临床应用潜力,内皮化被认为是保障小口径组织工程血管长期畅通的关键。然而,在复杂的病理微环境中,内皮细胞（ECs）可经历内皮-间充质转化（End MT）,进而诱导病理性血管重塑,引起TEBV狭窄或堵塞。炎症细胞分泌的炎症因子和生长因子,如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、转化生长因子-β（TGF-β）等是在End MT中起重要作用。本研究的目的是降低免疫细胞在材料表面的粘附与激活并抑制End MT,构建一种能够在移植后保持通畅的TEBV。方法:1.构建纳米载药体系,以缓释TGF-β信号通路小分子抑制剂LY2157299,通过免疫荧光染色、流式细胞术、Dil-ac-LDL摄取实验以及NO合成实验,验证纳米载药体系抑制End MT的效果;2.将CD47与VEGF共同修饰在材料表面,通过免疫荧光染色、ELISA检测CD47对巨噬细胞在材料表面的黏附与炎症因子分泌的影响,通过划痕实验和EPCs捕获实验,探究VEGF促进内皮化能力;3.将纳米载药颗粒、CD47与VEGF共同修饰在脱细胞血管表面,并移植到大鼠颈动脉,通过HE染色、多普勒彩超探究TEBV的抗血栓形成以及狭窄能力。结果:1.在TGF-β刺激下,纳米载药体系能够维持HUVECs的表型和生理功能;2.CD47减少了巨噬细胞在材料表面的黏附与激活,下调炎症因子的分泌,VEGF能捕获EPCs,同时促进ECs迁移,从而加快内皮化;3.修饰后的TEBV能够显著抑制血小板黏附,减少内膜增生。结论:修饰后的TEBV能够减少血栓形成和内膜增生,提高移植后的通畅率。
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