心肌细胞上的离子通道可引发和传导动作电位,除此之外,它们还能够共同维持膜的静息电位。因此,心肌上的各种离子通道可作为治疗长QT或短QT综合征等心脏类疾病的重要靶标。已知动物毒液中包含有丰富的多肽毒素,他们能高效地、特异地与多种离子通道相结合,可用于临床上的药物开发或离子通道疾病药理学机制的研究。因而在该课题中,我们采用全细胞式膜片钳分析了家福捕鸟蛛和东亚钳蝎的粗毒对新生大鼠心室肌细胞上动作电位及各离子通道亚型的电生理影响。在本实验中我们采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化新生大鼠的心室肌组织;采用差速贴壁法和化学抑制法共同来纯化、分离出新生大鼠的心肌细胞。据数据显示,分离的心肌细胞存活率高达90%-95%,培养4天后有75%的细胞开始搏动,搏动频率平均60次/min,心肌细胞的总体纯度在91%以上。膜片钳数据结果表明:100 μg/mL的家福捕鸟蛛能较明显的延长心肌动作电位时程(APDs),而100μg/mL的东亚钳蝎则能明显的缩短APDs。100 μg/mL家福捕鸟蛛粗毒能明显抑制80%的INa电流;95%的IKr总电流;并能明显延缓ICaL的失活速度,但是对IKs、Ito1和IK1电流无明显影响。类似地,100μg/mL东亚钳蝎粗毒能明显阻断INa电流,但对ICaL仅有微弱的抑制效果,而对心肌钾离子通道电流(Itol、Iks、Ikr和Ikl)几乎无影响。这两种动物粗毒都表现出的多样的药理学性质证明:蜘蛛和蝎子粗毒中含有丰富的心肌离子通道拮抗剂,在研究心肌离子通道特性方面和治疗心律失常方面有较好的开发前景。目前关于蟾酥药理作用方面的研究主要集中在抗肿瘤与镇痛作用的分子药理学领域,但它在离子通道方面的研究仍有待加强。本论文主要采用细胞培养、细胞转染和全细胞膜片钳等技术手段,研究蟾酥中的分离组分CS-toxicon331与不同亚型的钠通道相互作用,揭示了该组分可能的药理学机制。研究结果显示,CS-toxicon331对Nav1.7电流的峰值有较强的抑制作用;对抑制Nav1.3电流的峰值也有较好的抑制作用;也可抑制Nav1.4亚型通道电流的峰值。