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目的:本研究拟通过对BALB/c小鼠采用经口灌胃经超高压处理的大豆分离蛋白水溶液,观察灌胃后实验动物的一般情况,并且运用毒理学、免疫学等研究手段观察超高压处理后的大豆分离蛋白对BABL/c小鼠免疫功能的调节作用。
方法:按要求分批次每次购入50只清洁级的雄性BABL/c小鼠,按体重随机分为5个小组:分别为超高压处理大豆分离蛋白高剂量组(3.33g/kg)、超高压处理大豆分离蛋白中剂量组(1.67g/kg)、超高压处理大豆分离蛋白低剂量组(0.333g/kg)、普通大豆分离蛋白对照组(3.33g/kg)及空白对照组。各试验组均采用经口灌胃的方式给予受试物,观察动物的一般状态,每周称重一次;于灌胃第31天断髓处死动物,取胸腺和脾,去除血污称脏器湿重,并计算免疫脏器系数;同时进行细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫各指标的测定。
结果:
经口给予小鼠不同剂量的超高压处理大豆分离蛋白30d,各实验组小鼠体重变化及脏器系数各实验组没有显著差异(P>0.05)。
1、抗体生成细胞检测实验结果显示:pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg组抗体生成细胞OD值高于SPI0g/kg组(P<0.05);超高压处理大豆分离蛋白组与普通对照nSPI3.33g/kg组抗体生成细胞的OD值无差异(P>0.05)。
2、血清溶血素实验测定结果显示:与SPI0g/kg组相比时,pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg组半数溶血值的OD值高于对照SPI0g/kg组(P<0.01);pSPI3.33g/kg组半数溶血值OD值高于普通对照nSPI3.33g/kg组(P<0.05)。
3、T淋巴细胞增殖活性结果显示:超高压处理大豆分离蛋白组pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg组淋巴细胞增殖的OD值高于nSPI3.33g/kg(P<0.05);超高压处理大豆分离蛋白pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg组淋巴细胞增殖的OD值高于SPI0g/kg(P<0.01)。
4、足跖增厚程度检测实验结果显示:超高压处理的大豆分离蛋白组pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg两个剂量组的足跖增厚程度高于空白对照组SPI0g/kg(P<0.05);超高压处理大豆分离蛋白pSPI1.67g/kg、pSPI3.33g/kg两个剂量组的足跖增厚程度高于nSPI3.33g/kg组(P<0.05)。
5、NK细胞杀伤活力试验结果显示:pSP/3.33g/kg组NK细胞的OD值高于SPI0g/kg组(P<0.05),超高压处理大豆分离蛋白pSPI1.67g/kg,pSPI3.33g/kg组NK细胞的OD值高于普通大豆分离蛋白nSPI3.33g/kg组(P<0.05)。
6、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验及小鼠碳粒廓清实验结果显示:超高压处理大豆分离蛋白各剂量组的吞噬率与吞噬指数与空白对照组和普通大豆蛋白组相比无差别(P>0.05);超高压处理大豆分离蛋白各剂量组的吞噬率与空白对照组和普通大豆蛋白组相比无差别。
结论:参照中华人民共和国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》3002版中关于免疫调节功能的结果判定标准,我们得出以下结论:经过30d的喂养,超高压处理的大豆分离蛋白对小鼠体重及免疫器官脏器系数、巨噬细胞吞噬功能无影响,但可以明显上调小鼠的细胞免疫,体液免疫及NK细胞杀伤活力。因此,超高压处理技术可以增强大豆分离蛋白的免疫调节功能。