论文部分内容阅读
目的:观察大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3和AQP4蛋白在皮层和海马区表达以及依达拉奉的干预作用,进而探讨脑缺血-再灌注损伤后是否诱导自噬发生,以及干预组对自噬相关蛋白及AQP4的影响。方法:将SD雄性大鼠(共32只)随机分为以下几组:假手术组、模型组、依达拉奉组。采用Zea Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞模型(缺血2 h再灌注24 h),其中假手术组仅分离左侧颈总动脉,不予阻塞大脑中动脉。10 mg/kg的依达拉奉于再灌注前15 min经腹腔注射给药。采用神经行为学评分评估大鼠脑神经损伤情况;TTC染色判断模型是否成功以及脑损伤程度;HE染色观察海马和皮层区神经元变化;电镜观察脑神经元的超微结构;免疫组化及Western blot检测Beclin-1、LC3和AQP4的表达情况。结果:神经行为学评分结果显示,脑缺血-再灌注24 h后,模型组明显出现神经功能损害症状(P<0.05),干预组能减轻上述症状(P<0.05);TTC染色结果显示,模型组观察到大鼠脑部明显出现梗死灶,干预组能够减少脑部梗死面积;HE结果显示,脑缺血-再灌注24 h后,和假手术组相比,模型组皮层和海马区神经元排列紊乱,核固缩,干预组减轻神经元损伤;电镜结果发现脑缺血-再灌注24 h后,神经元分布稀疏,细胞间隙增宽,胞浆肿胀,基质密度降低,异染色质沉积,神经细胞有空泡变,干预组上述情况得以改善;免疫组化结果显示,脑缺血-再灌注24 h后,与假手术组相比,模型组Beclin-1、LC3和AQP4蛋白表达增加(P<0.05),干预组能够下调Beclin-1、LC3和AQP4表达(P<0.05);Western blot结果与免疫组化结果一致。结论:脑缺血-再灌注损伤后,大鼠皮层和海马神经元受损伤,自噬相关蛋白Beclin-1、LC3和AQP4蛋白表达水平增加,提示脑缺血-再灌注损伤可能诱导自噬发生,AQP4与自噬可能有直接相互联系。而依达拉奉可能通过调节自噬相关蛋白和AQP4表达,减轻脑损伤。