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背景卵巢癌是死亡率居第一位的妇科恶性肿瘤,严重危害女性健康,其早期症状不典型,缺乏有效的诊断措施,超过70%的卵巢癌患者初次确诊时即为晚期（Ⅲ～Ⅳ期）,肿瘤常累及壁层腹膜和（或）发生腹盆腔内广泛转移,5年生存率仅29%。卵巢癌标准的治疗方式是手术联合辅助化疗,尤其是晚期卵巢癌的规范治疗和全程管理有助于提高其生存率。彻底手术并达到无肉眼残留病灶（R0）,辅以铂类为基础的联合化疗及恰当的维持治疗,是目前晚期卵巢癌规范化诊治的主要内容。然而70%的患者即使接受了标准的初始治疗之后仍会出现疾病复发,其中铂耐药复发的治疗尤为棘手。此外针对特异性患者选择恰当的维持治疗方案也是目前晚期卵巢癌研究的重点。因此,探究卵巢癌发生发展的分子机制,寻找新的治疗靶点,探索新的靶向治疗方案,对改善卵巢癌患者的预后具有重要意义。miRNAs是主要存在于真核生物中的长度约18～25个核苷酸,内源性非编码小分子RNA,通过对靶mRNA降解或抑制翻译等过程进而实现对基因表达的调控。miRNAs参与细胞周期、增殖分化、炎症反应、肿瘤形成和发展等几乎所有的生物过程。研究发现miRNAs在不同类型的卵巢癌中存在表达差异,提示其可能参与卵巢癌发生发展、转移、耐药的过程,与患者治疗效果及生存率存在密切关系,对卵巢癌患者的诊断、治疗及预后又重要意义。近年来,有研究发现miR-4324在食管癌及乳腺癌组织中异常地表达,然而miR-4324在卵巢癌中表达情况以及对卵巢癌增殖、凋亡等相关研究少。因此本研究拟在细胞学水平探究miR-4324对卵巢癌发生发展中的作用机制。目的探究miR-4324在正常细胞和卵巢癌细胞中的表达情况,研究miR-4324对卵巢癌细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响,为miR-4324作为在卵巢癌早期诊断和治疗的靶点提供参考。方法1.利用qRT-PCR技术检测miR-4324在卵巢癌细胞株SKOV3及正常卵巢上皮细胞株IOSE80中的表达情况;2.将 NC、miR-4324 mimic 和 miR-4324 inhibitor 转染人卵巢癌细胞株 SKOV3后,CCK8检测转染后的卵巢癌SKOV3细胞增殖情况;流式检测细胞凋亡和细胞周期;qRT-PCR检测miR-4324的表达,Western blot检测PCNA、Caspase-3 和 p27 的表达。结果1.miR-4324在卵巢癌细胞SKOV3和正常卵巢上皮细胞IOSE80中表达量分别为1.009±0.172和5.357±0.539（t=13.30,P＜0.001）,差异具有统计学意义,提示miR-4324在卵巢癌细胞中低表达。2.NC、miR-4324 mimic 和 miR-4324 inhibitor 在卵巢癌细胞株 SKOV3 中成功转染。CCK8检测发现,转染后48h、72h,与NC组相比,miR-4324 inhibtor组的SKOV3细胞增殖率明显增加,而miR-4324 mimic组则减少（P＜0.01）。3.NC、miR-4324 mimic 和 miR-4324 inhibitor 转染卵巢癌细胞株 SKOV3 后,流式细胞术检测细胞周期情况。（1）G1期:三组细胞数对比差异有统计学意义（F=172.054,P＜0.001）,进一步两两对比,miR-4324 mimic 组较 NC 组 G1 期细胞数量明显增加（P=0.0001）,而miR-4324 inhibtor组较NC组减少（P=0.0071）,miR-4324 inhibtor 组较 miR-4324 mimic 组减少（P=0.0071）,差异有统计学意义。（2）S期:三组细胞数对比差异有统计学意义（F=23.014,P＜0.05）,进一步两两对比,与NC组相比,miR-4324 mimic组S期细胞数量明显减少（P=0.0126）,miR-4324 inhibtor 组较 miR-4324 mimic 组增加（P=0.0058）,差异有统计学意义。（3）G2期:经方差分析,F=33.910,P＜0.001,三组差异有统计学意义,mimic组较NC组减少（P=0.0479）,inhibitor组较NC组增加（P=0.0178）,miR-4324 inhibtor 组较 miR-4324 mimic 组增加（P=0.001）,差异有统计学意义。以上结果表明,miR-4324可能改变了卵巢癌细胞周期。4.NC、miR-4324 mimic 和 miR-4324 inhibitor 转染卵巢癌细胞株 SKOV3 后,流式细胞术检测细胞凋亡情况。三组细胞凋亡率对比,经方差分析F=1938.89,P＜0.001。两两对比,mimic组细胞凋亡率明显高于inhibitor组,差异具有统计学意义（t=26.088,P＜0.001）。以上结果提示miR-4324可以促进SKOV3细胞的凋亡。。5.NC、miR-4324 mimic 和 miR-4324 inhibitor 转染卵巢癌细胞株 SKOV3 后,Western blot 检测 PCNA、Caspase-3 和 p27 的表达。与 NC 组相比,mimic 组 PCNA表达量降低,caspase-3表达量升高,p27表达量升高。另外,inhibitor组较NC组,PCNA表达量升高,Caspase-3表达量降低,p27表达量降低。结论1.miR-4324在卵巢癌组织和细胞中呈低表达;2.miR-4324能够抑制卵巢癌细胞增殖、促进凋亡,改变卵巢癌细胞的细胞周期;miR-4324可能是卵巢癌患者诊断、治疗和预后的分子标志物。