基于代谢组学对艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证的物质基础研究

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目的采用代谢组学技术筛选艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证的代谢标志物与代谢通路,为艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证型的判别提供客观物质基础依据。研究方法1.设立艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证组(FP),艾滋病免疫重建不良非肺脾气虚证组(FF),艾滋病免疫重建良好组(LH),健康人组(JK),依据艾滋病免疫重建不良、艾滋病免疫重建良好、健康人及各证型诊断标准筛选受试者。其中FP组60人,FF组25人,LH组15人,JK组15人。2.对115名受试者的基本信息,如年龄、性别进行记录。3.对115名受试者进行血清采集,对样本进行预处理,统计方法采用多变量分析法根据组间比较的P值,VIP值,差异倍数对潜在代谢标志物进行筛选。4.在初步筛选的潜在差异代谢标志物中进一步筛选艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证组的代谢标志物,通过组间(FP:JK)、(FP:FF)、(FP:LH)比较筛选3个比较组中都具有的差异代谢标志物,确定为艾滋病免疫重建不良肺脾气虚证的代谢标志物。5.最终筛选的代谢标志物中通过检索“人类代谢物数据库”(The human Metabolome Database,HMDB)确定物质信息,Metabo Analyst 5.0(https://www.metaboanalyst.ca/)的Pathway Analysis功能进行代谢组学通路分析。结果1.性别分布比较FP组女性8例,男性50例,共计58例;FF组女性10例,男性15例,共计25例;LH组女性5例,男性10例,JK组女性10例,男性5例。卡方检验显示不同组间性别分布无差异,无统计学意义(P>0.05);年龄分布比较FP组共计58例,年龄最小的为20岁,最大的为62岁,平均年龄44.29岁;标准差11.93;FF组共计25例,年龄最小的为24岁,最大的为57岁,平均年龄48.12岁;标准差8.23;LH组共计15例,年龄最小的为25岁,最大的为58岁,平均年龄42.27岁;标准差12.40;JK组共计15例,年龄最小的为36岁,最大的为57岁,平均年龄47.47岁;标准差4.77。各组年龄差异无统计学意义(P>0.05)。2.FP组与JK组比较共筛选出444种差异代谢物,FF组与JK组共筛选出309种差异代谢物,LH组与JK组315种差异代谢物。3.在上述已经筛选出来的潜在差异代谢物质基础上(共1068种潜在差异代谢标志物)进一步筛选艾滋病免疫重建不良肺脾气虚组证的代谢标志物。二次筛选3个比较组(FP:JK)、(FP:FF)、(FP:LH)共同具有的差异代谢标志物,共发现43种潜在差异代谢物,12种代谢物能确定化学式,31种代谢物不能确定化学式。其中12种可能差异代谢物可能是鞘磷脂(SM)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰肌醇(PI)、儿茶酚胺(Epinephrine)、DE环氧物(1,1-Dichloroethylene epoxide)等。涉及3条代谢通路,分别是鞘脂代谢通路、酪氨酸代谢通路、通路细胞色素P450代谢通路。结论基于血清代谢组学分析鞘磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、儿茶酚胺、DE环氧化物等可能是区分艾滋病免疫重建不良肺脾气虚(FP)组与艾滋病免疫重建不良非肺脾气虚(FF)组、艾滋病免疫重建良好(LH)组的典型差异代谢标志物,为艾滋病免疫重不良肺脾气虚证(FP)的证型判别提供理论依据。
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