论文部分内容阅读
目的:慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一组异质性较大的疾病,病程差异很大。脂蛋白酯酶(LPL)在脂质代谢以及催化乳糜微粒和极低密度脂蛋白的水解过程中起重要作用。LPL通常在脂肪组织、心肌、骨骼肌和乳腺组织中表达;在巨噬细胞、肾上腺及卵巢腺体细胞、神经细胞、胸主动脉、脾、睾丸、肺和肾脏中低表达。近来研究发现LPL在CLL细胞中表达,为CLL重要的预后因素之一,其表达水平与IgVH基因突变情况有很强的相关性。本研究通过检测CLL患者LPL表达情况,分析LPL与临床Binet分期、ZAP-70蛋白、CD38表达、IgVH基因突变以及分子遗传学异常等其他预后因素的关系,探讨LPL在CLL预后中的意义。方法:采用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测62例CLL患者外周血标本中LPL的表达水平,并检测10例正常对照及3例CD19~+磁珠分选的CLL细胞中LPL的表达。用Spearman相关分析LPL表达水平与IgVH基因突变、ZAP-70蛋白和CD38表达等预后因素的关系,不同分组LPL表达水平的差异采用Mann-Whitney U检验分析,并用logistic回归进行多因素分析,ROC曲线确定LPL表达的最佳分界值,计算对IgVH突变情况的阳性及阴性预测值。结果:荧光定量PCR标准曲线的斜率在-3.2～-3.6之间,相关系数R均大于0.99,敏感度可以检测到10~2个拷贝/μRNA,批内差、批间差分析结果其CV均小于5%。62例CLL患者LPL表达水平中位数为0.006(0～0.737)。在10例正常人中LPL均不表达或低表达(LPL相对表达量范围为0～0.0004)。在经CD19磁珠分选后的3例CLL患者标本中,LPL相对表达量与分选前标本表达水平相似。LPL表达水平与IgVH基因突变情况相关(P=0.02)。IgVH无突变患者的LPL表达水平明显高于突变患者。LPL表达水平与ZAP-70及CD38均显著相关。按照IgVH突变情况作为标准对LPL表达水平做ROC曲线分析确定最佳分界值为0.036,敏感度为66.7%,特异度为72.4%,对IgVH突变情况阳性预测值(无突变)为51.8%,阴性预测值(有突变)为83.3%。在伴有+12而无del(17p13)或del(11q22)分子遗传学异常的CLL患者中LPL表达水平高(P=0.001)。结论:采用荧光定量PCR方法检测LPL表达敏感可靠。CLL外周血单个核样本无需分选即可检测LPL表达。LPL表达水平与CLL重要预后因素IgVH基因突变、ZAP-70、CD38密切相关,并可较准确的预测IgVH突变情况,在CLL的预后中具有重要价值。