鸦胆子素D诱导胶质瘤细胞凋亡及其机制研究

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目的:研究鸦胆子素D对胶质瘤细胞增殖,迁移及凋亡的影响,并探讨相关分子机制。方法:分别用不同浓度的鸦胆子素D处理增殖期的U251细胞36小时,分为低浓度组(20umol/L)、高浓度组(40umol/L)、DMSO组、空白对照组。CCK-8实验检测各组U251细胞增殖吸光度值(OD值);Transwell细胞迁移实验检测各组胶质细胞瘤U251迁移的细胞能力;流式细胞术评估鸦胆子素D对胶质瘤细胞凋亡的影响。JC-1和DCFH-DA分别用来检测细胞内线粒体跨膜电位水平(MMP)和活性氧水平(ROS)。Western blot技术检测凋亡相关蛋白的表达,包括细胞色素C、Bax、Bcl-2、caspase-9和caspase-3等。结果:CCK-8结果显示鸦胆子素D能抑制胶质瘤细胞U251增殖。流式细胞术结果显示鸦胆子素D可诱导胶质瘤细胞凋亡。DCFH-DA及JC-1探针检测发现鸦胆子素D诱导胶质瘤细胞内ROS的产生,从而导致胶质瘤细胞内线粒体的损伤。此外,Western-blot结果显示鸦胆子素D能上调线粒体凋亡通路蛋白—细胞色素C,Bax,caspase-9及caspase-3的表达,下调Bcl-2表达,促进胶质瘤细胞凋亡。结论:鸦胆子素D能抑制胶质瘤细胞增殖,迁移,促进细胞凋亡,可能通过调控胶质瘤细胞线粒体细胞色素C,Bax,caspase-3等基因表达发挥作用。
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