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目的：研究引起血流感染的肠球菌的分布与耐药性、毒力基因以及生物膜的形成情况,了解耐万古霉素的肠球菌的耐药基因和分子流行病学特点。 方法：采用药敏分析软件WHONET对2008年~2012年分离自解放军总医院患者血流感染中肠球菌进行回顾性分析。将保存的菌种复活,用Vitek-2全自动细菌鉴定仪进行鉴定,用纸片法检测肠球菌对抗菌药物氨苄西林,环丙沙星,红霉素,利奈唑胺的敏感性,用琼脂稀释法进行高浓度氨基糖苷类抗生素的敏感性试验,用E-test法进行万古霉素和替考拉宁的敏感性试验。应用聚合酶链式反应(PCR)对肠球菌的毒力基因和耐万古霉素基因进行检测,用微孔板法进行生物膜形成试验。用脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型对耐万古霉素的肠球菌菌株进行分子流行病学分析。 结果：本研究共收集到211株肠球菌,包括161株屎肠球菌与50株粪肠球菌。其抗菌药物敏感性试验结果如下:屎肠球菌和粪肠球菌对氨苄西林的耐药率为93.2％和22%,对环丙沙星的耐药率为93.7%和44%,对红霉素的耐药率为87.0%和72%。耐高浓度庆大霉素的屎肠球菌和粪肠球菌分别占68.3%和40%,耐高浓度链霉素屎肠球菌和粪肠球菌分别占15.5%和30%。屎肠球菌对万古霉素的耐药率是5.6%,对替考拉宁的耐药率为1.9%,对利奈唑胺全敏感。粪肠球菌对万古霉素,替考拉宁,利奈唑胺皆敏感。28株粪肠球菌的毒力基因asa1, esp,cylA,gelE的检出率分别为75%,75%,64.3%,85.7%,未检测到hyl基因;54株屎肠球菌对esp和hyl的检出率分别为72%和31.5%,未检测到其他三种基因。粪肠球菌和屎肠球菌形成生物膜阳性菌株的比率分别为85.7%和63.0%。耐万古霉素的肠球菌共9株,均携带有vanA基因,未检测到vanB基因。脉冲场凝胶电泳分型的结果显示,耐万古霉素的肠球菌各菌株具有不同的分子表型,9株VRE可被分为9个克隆。多位点序列分型的结果显示,9株耐万古霉素肠球菌株分别属于ST78(7/9)、ST192(1/9)和ST804(1/9)型,其中ST78与ST192属于CC17克隆复合体。 结论：肠球菌致血流感染呈逐年升高趋势,而且屎肠球菌显著高于粪肠球菌。屎肠球菌对氨苄西林,环丙沙星,红霉素,高浓度庆大霉素和链霉素等耐药率较高,呈多重耐药性。粪肠球菌在主要毒力基因的种类、毒力基因检出率及生物膜形成阳性菌株数均高于屎肠球菌。致血流感染的耐万古霉素的屎肠球菌分属于不同的克隆,但除一株外,均属于国内耐万古霉素屎肠球菌的优势克隆群。