【摘 要】
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桃树（Prunus persica L.）根系分布较浅,容易遭受干旱等逆境伤害。精氨酸脱羧酶（ADC）是多胺生物合成的关键酶,在植物应答逆境响应过程中起重要的调控作用。本研究基于桃树在水分胁迫下的表型及生理指标的变化,以不同干旱时间处理的桃幼苗为材料,进行转录组测序,筛选出响应干旱胁迫的PpADC基因。构建过表达PpADC-p BI121-EGFP载体,对PpADC基因进行异源转化Micro-To
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桃树（Prunus persica L.）根系分布较浅,容易遭受干旱等逆境伤害。精氨酸脱羧酶（ADC）是多胺生物合成的关键酶,在植物应答逆境响应过程中起重要的调控作用。本研究基于桃树在水分胁迫下的表型及生理指标的变化,以不同干旱时间处理的桃幼苗为材料,进行转录组测序,筛选出响应干旱胁迫的PpADC基因。构建过表达PpADC-p BI121-EGFP载体,对PpADC基因进行异源转化Micro-Tom番茄,获得转基因番茄材料,并研究了干旱胁迫条件下过表达PpADC转基因番茄表型。克隆桃树PpADC启动子,并分析顺式作用元件,构建p BWA（V）HG-PpADC启动子融合载体并进行异源转化AC番茄,并通过GUS染色检测PpADC启动子活性。为后续PpADC功能验证提供依据。具体研究结果如下:（1）在干旱和淹水胁迫处理下,桃幼苗体内相对电导率整体呈现出升高的趋势。在干旱胁迫处理下桃树体内叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量和类胡萝卜素整体呈现上升的趋势。（2）在干旱胁迫处理下,桃叶片SOD和POD酶活性呈现先下降后上升的趋势。在淹水胁迫处理下,桃叶片SOD酶活性整体呈现上升趋势,而POD酶活性整体呈现先下降后上升再下降的趋势。在干旱胁迫和淹水胁迫下桃树体内CAT整体呈现上升趋势。说明桃树在逆境胁迫下能够及时清除体内产生的活性氧,及时作出反应以抵御干旱胁迫。（3）对不同干旱程度的桃幼苗材料进行转录组测序,鉴定出差异表达基因21 348个,其中上调10 105个,下调11 243个。分析桃PpADC基因的表达模式,结果表明在干旱胁迫的第5d,其表达量最高。（4）构建PpADC-p BI121-EGFP过表达载体,获得番茄转基因植株。通过DAB和NBT染色发现,在甘露醇处理条件下,转基因番茄植株清除自由基的能力更强。（5）克隆PpADC启动子,并分析顺式作用元件。结果表明PpADC启动子包含干旱响应元件、早期脱水响应元件和rd22脱水应答基因结合位点。构建了PpADC启动子融合表达载体,利用根癌农杆菌介导法异源转化番茄,GUS染色表明PpADC启动子在转基因番茄植株的叶片和根系中表达。
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