角膜是眼球最前端的圆盘状无血管薄膜。组织学上可以把角膜由外向内分为五层，其中最外层即上皮层。作为眼球的屈光系统成分之一，角膜是眼的主要反射界面。角膜的高透明度是抑制光线散射、保持健康视力的重要基础。 近年来，随着工农业生产和经济建设的深入进行，角膜化学烧伤特别是碱烧伤的危害日益突出。尽管临床上最有效的治疗手段是角膜移植，但和治疗其它角膜病变的移植相比，碱烧伤条件下的成功率是最低的。而且角膜供体和受体需求严重失衡的矛盾以及组织工程化角膜进程的缓慢都不同程度地阻碍着角膜移植手术的开展。因此，深入开展角膜碱烧伤条件下的组织修复研究是十分必要的，特别是结合与角膜移植和组织工程效果密切相关的角膜缘的研究。 正常情况下角膜上皮具有很强的再生能力，这和角膜缘上皮基底层存在着角膜干细胞有关，角膜干细胞是角膜上皮细胞增殖和分化的源泉。但在遭受化学烧伤特别是碱烧伤后，由于复杂的病理过程和持续的损伤作用，往往导致不同部位损伤后的修复过程和效果有所不同。然而迄今为止，有关这方面的研究还少有报道。 本课题立足于系统研究角度，以新西兰大白兔和合法渠道获得的人类胚胎的新鲜角膜为主要实验材料，以角膜缘和中央角膜为具体研究对象，结合离体和在体研究，从细胞培养及形态学、PA／PAI级联研究和应激基因筛选等三个方面探讨角膜碱烧伤条件下的组织修复规律以及角膜干细胞在创伤愈合中的作用。 一、角膜缘和中央角膜在碱烧伤后修复过程中的细胞培养及形态学研初步鉴定。所采用的实验方法是SSH、细胞培养、RTICR、分子克隆以及生物信息学等相关技术。 实验结果发现免角膜缘碱烧伤后差异表达的应激调控基因片段5条，其中上调基因片段3条，下调基因片段2条，已通过初步鉴定，并进行了GeneBank登录。其中新1号样品可能是TSP家族中TSPZ系列的新成员，。推测和碱烧伤条件下角膜干细胞的原始应激产物有关。 实验结果还提示，TSPZ在碱烧伤后组织修复过程中的作用应该得到重视和进一步研究。