热和化学物质最佳诱导枯草杆菌芽孢萌发条件的研究

来源 :宁夏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wmxlg2008
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芽孢对各种杀菌处理有极端抗性,但其萌发后很容易被杀灭。诱导芽孢萌发的因素有很多,本文研究了温度预处理以及化学物质对枯草杆菌芽孢的萌发效果。本文采用不同的化学物质、化学物质的组合、温度预处理与化学物质相结合以及萌发剂与抑制剂相结合对枯草杆菌芽孢进行处理,以萌发效果为研究指标,全面、系统地分析了各种方案对枯草杆菌芽孢萌发的诱导效果,最后为更高效地诱导芽孢萌发提供理论依据。研究得主要结论如下:(1)实验首先研究了化学物质诱导芽孢萌发效果,结果表明DPA、肌苷、十二胺、L-丙氨酸和D-葡萄糖能迅速诱导芽孢萌发,芽孢的OD600值和折光性会迅速降低,其中DPA、D-葡萄糖以及肌苷在37℃诱导芽孢的萌发率高于25℃,而L-丙氨酸和十二胺则是在25℃条件下诱导芽孢萌发率高于37℃,且DPA的诱导萌发效率明显高于其他化学物质,随着时间的增加,前10min芽孢萌发率迅速上升,之后趋于平缓。(2)通过对温度预处理与化学物质相结合对芽孢萌发诱导作用的研究,发现在60℃条件下预处理15 min,再添加DPA诱导枯草杆菌芽孢萌发,芽孢的萌发率有所提高,可达到98%以上。温度预处理结合L-丙氨酸、十二胺同样可以提高枯草杆菌芽孢萌发率,且40℃温度预处理诱导芽孢萌发的效果要高于60℃。通过透射电镜观察芽孢,发现DPA结合温度预处理可以导致芽孢内部结构发生明显变化。(3)采用不同芽孢萌发剂的组合来诱导芽孢萌发,结果表明DPA与十二胺以及DPA与L-丙氨酸相结合可以诱导枯草杆菌芽孢萌发,但芽孢萌发率却不及单独使用DPA。DPA、十二胺和L-丙氨酸相结合可以提高枯草杆菌芽孢萌发率,但也存在一些多种萌发剂的组合对枯草杆菌芽孢萌发的诱导效果并不显著,甚至有些组合并不能使枯草杆菌芽孢萌发。(4)通过对D-丙氨酸、HgCl2、NaHCO3与芽孢萌发剂相结合对枯草杆菌芽孢萌发抑制效果的研究,发现其中HgCl2对芽孢萌发的抑制效果明显高于D-丙氨酸和NaHCO3, D-丙氨酸对芽孢萌发的抑制效果高于NaHCO3,当加入十二胺和L-丙氨酸时NaHCO3对芽孢的萌发并没有任何抑制作用。并且随着时间的增加,D-丙氨酸、HgCl2、NaHCO3对枯草杆菌芽孢的抑制作用逐渐趋于平缓。
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