【摘 要】
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目的：了解不同浓度胰岛素对拟胚体(embryoid body, EB)神经系统发育相关基因时序性表达的影响。方法：采用小鼠EB为研究对象,体外培养模拟胚胎早期发育,以60pM及6nM胰岛素进行干
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目的：了解不同浓度胰岛素对拟胚体(embryoid body, EB)神经系统发育相关基因时序性表达的影响。方法：采用小鼠EB为研究对象,体外培养模拟胚胎早期发育,以60pM及6nM胰岛素进行干预,并分别于培养的第1、3、5、7、9、11天收集EB细胞；利用实时荧光定量PCR技术检测神经系统相关基因Sox2、Fgf5、 Pax6、Arx的时序性表达。结果：1.从形态学看,60pM组EB状态优于6nM组；60pM组EB第5天开始出现囊腔化趋势,第7天形成囊化腔；6nM组EB第7天才开始出现囊腔化趋势,且在整个实验过程中一直没形成囊化腔；2.6nM胰岛素组EB的Sox2、Fgf5、Pax6、Arx的表达量均明显高于60pM组EB；3.Sox2基因表达在2组EB第5天达到高峰,第11天同时降至最低；4.Fgf5基因在2组EB前5天的表达量都很低,随后出现表达增加,60pM组第7天到达高峰,6nM组第7天明显升高,第9天到高峰,至11天2组表达同时下降至同一水平；5.Pax6基因在6nM组中从第3天开始上升,第7天到达高峰,11天下调至最低水平,而在60pM组中其表达均低于6nM组；6.2组EB中Arx基因的表达从第7天开始明显上升,第9天达到高峰,但6nM组的Arx表达明显高于60pM组,至第11天2组EB中Arx表达回落至同一水平。结论：1.随培养时间的不同,Sox2、Fgf5、Pax6、Arx的表达呈动态变化。2.不同浓度胰岛素对神经相关基因的表达的影响不同,与生理浓度(60pM)胰岛素相比,6nM胰岛素可以促进胚胎外胚层标记基因Fgf5,神经全能性标记基因Sox2,神经分化基因Pax6、Arx的表达。
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