团头鲂bcl2l13在细胞凋亡中的作用

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:GOG12
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
团头鲂(Megalobrama amblycephala)是我国重要的经济养殖鱼类,但较于其他鲤科鱼类,其低氧耐受性能较差。B细胞淋巴瘤2样蛋白13(Bcl-2-like protein 13,Bcl2l13)被认为是Bcl-2蛋白家族一员,在不同条件下,能够正调控或负调控细胞凋亡。与家族其他蛋白不同的是,Bcl2l13包含四个BH、一个BHNo结构域以及一个跨膜结构域(Transmembrane domain,TMD)。课题组前期研究发现低氧会导致团头鲂组织细胞凋亡,bcl2l13的表达量上调,但Bcl2l13在鱼类细胞凋亡中的作用如何?其不同结构域是否参与调控等问题仍然是不清楚的。因此,为了研究团头鲂Bcl2l13在细胞凋亡中的作用,本研究基于过表达和敲降实验,分析了该基因及其不同结构域在细胞增殖和凋亡中的作用。主要研究结果如下:1.利用CCK-8、RT-qPCR和hochest 33258染色法检测Bcl2l13及其结构域对细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,在过表达Bcl2l13后,细胞增殖显著减少,凋亡率上升。缺失TM或BHNo结构域后,Bcl2l13抑制细胞增殖和凋亡的能力在不同程度上减弱了,同时缺失这两个结构域后其功能进一步被削弱。我们推测,团头鲂Bcl2l13能够抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,且其TM和BHNo结构域对细胞增殖和凋亡的调控十分重要,尤其是TM结构域对细胞增殖和凋亡的调控十分重要。2.基于RT-qPCR和Calcein AM-Co Cl2染色法来分析团头鲂Bcl2l13通过哪些途径介导细胞凋亡。结果显示,当干扰了bcl2l13的表达后caspase 3、cyt-c、fas等基因表达量显著下调,说明Bcl2l13介导的细胞凋亡与线粒体及死亡受体途径相关。进一步研究发现过表达Bcl2l13后,线粒体通透性转化孔(Mitochondrial permeability transition pore,m PTP)通透性增加,而在缺失了TM结构域后,m PTP相对降低,说明Bcl2l13可能通过调控m PTP来调节细胞凋亡。3.采用RT-qPCR和Annexin V FITC/PI法检测在不同细胞内过表达Bcl2l13及TM结构域缺失体后的细胞凋亡情况。结果显示,过表达Bcl2l13对FHM细胞和EPC细胞有促凋亡趋势,且缺失了TM结构域后,细胞凋亡情况有所变化,但在FHM细胞中差异不明显,在EPC细胞中效果较为显著。在He La细胞中Bcl2l13有显著的抑制凋亡功能,缺失TM结构域后抑制凋亡的功能被明显削弱。通过团头鲂及人Bcl2l13氨基酸序列比对分析,发现两者的BHNo结构域的同源性较差,因此推测在He La细胞中过表达团头鲂和人Bcl2l13后效果不一致的现象是BHNo结构域相似性较低导致的。4.研究发现Bcl2l13过表达后能显著下调ndufa2、cox17、sdha的表达量,负调控氧化磷酸化通路。另外,过表达bcl2l13会导致rps21上调,亚细胞共定位显示,他们在线粒体有部分共定位区域,推测bcl2l13可能直接调控rps21的表达。
其他文献
劳动是人类赖以生存和发展的基本方式,劳动观是影响人类发展的必要精神力量。随着新时代党和国家“德智体美劳”全面发展教育方针的提出,大学生劳动观教育的重要性也逐渐凸显。劳动观教育不仅可以促进大学生自身能力的锻炼和潜能的激发,成为全面发展的人才,同时也是推进高校落实立德树人的根本任务,推动实现中国梦的重要力量。新时代背景下,大学生劳动观教育应总结历史渊源,汲取实践经验,顺应时代更新观念,对大学生劳动观教
学位
为坚定广大青年的马克思主义信仰,为党的事业储备优秀的青年政治骨干人才,共青团中央于2007年正式启动“青年马克思主义者培养工程”(以下简称“青马工程”)。高校作为“青马工程”的实施主阵地,积极回应党团号召,大力开展青年马克思主义者培养工作,十余年来成效显著。但现实地看,高校“青马工程”学员(以下简称“青马学员”)在身份认同方面虽有积极表现,也存在一些问题。面向省内多所高等院校的500名“青马学员”
学位
在脊椎动物发育过程中,造血干前体细胞(Hematopoietic stem and progenitor cells,HSPCs)从背主动脉腹侧的生血内皮中分化出来,其形成和功能由各种信号通路之间相互作用而控制。斑马鱼已被证明是一种简单的化学遗传学系统,并被用于探究包括造血在内的各种调节器官发生的途径。在本研究中,我们通过斑马鱼囊胚期胚胎原代培养细胞高通量筛选系统发现促进造血的药物BF-170。B
学位
2016年以来,短视频平台发展迅速。作为短视频平台的典型代表,快手依托强大的人工智能技术和“去中心化”的分发逻辑,在短视频生产方式、流量分发、社区建设方面,精准匹配低线城市和乡镇用户的文化需求。从短视频再生产过程来看,快手主播通常出于获得关注和经济收益的明确目的创作短视频,主播通过建立虚拟亲密关系的互动和在短视频中建构真实感的视听修辞,得到用户的信任与认同,使用户在乐于观看短视频的同时积极参与社区
学位
鳜(Siniperca chuatsi)是我国淡水名优鱼类,因富含蛋白质、无肌间刺等特点,深受消费者喜爱。目前,国内鳜养殖最主要方式为池塘养殖,以投喂活饵为主,尚存在养殖水体水质恶化、病害多发、用药量大、药残问题突出和品质低下等一系列问题,限制了鳜产业健康发展,因此亟需推动鳜养殖模式转型升级。作为新型集约化生态绿色养殖模式,圈养模式具有节能减排、提质增效等优点。本文研究鳜的圈养技术,以期为鳜高效、
学位
磷酸三(2-丁氧基)乙酯(Tris(2-butoxyethyl)phosphate,TBOEP)作为一种被广泛应用于化学材料、电子通信、纺织、家具等行业的阻燃剂,在水体、空气、土壤及生物体中常被检测到。有研究表明TBOEP可在水生生物体内富集,并损伤其生殖、神经以及内分泌系统。TBOEP对雌性的毒性效应比雄性大,并能通过母体传递导致子代的发育毒性,但其分子机制仍不明确。先前的研究多为同时暴露雌性亲
学位
近几年,在“纯文学”阅读整体不景气的大背景下,以双雪涛、班宇、郑执为代表的东北籍作家独树一帜,引发较广泛的关注,成为当代文坛上的热点现象,他们三人也被称为“铁西三剑客”。在严肃文学萎靡的现状下,为什么双雪涛、班宇、郑执三人能引起广泛关注?正是因为双雪涛、班宇、郑执出身于东北工人家庭,这种天生的“身份自觉”使他们在同时代作家中脱颖而出。他们的小说创作能够从工人“子一代”的角度去看待东北的时代变革,将
学位
中华圆田螺(Cipangopahudina cathayensis)和中国圆田螺(Cipangopahudina chinsensis)均属于圆田螺属(Cipangopahudina),它们均具有重要的经济与生态价值。近年来,由于限制捕捞和生产量的下降,无法满足市场需求,所以扩大其生产规模,提高其生产量是渔业生产中的急需解决的问题。因此对圆田螺的形态特征,繁殖生物学与生长进行初步研究,为圆田螺的选
学位
2020年7月,广东省珠海市金湾区的多处黄鳍鲷养殖场发生以翻滚打转、眼球充血脱落、鳍条充血、肛门红肿、脑部充血、肠道积液等为主要症状的传染病,为明确其病因,本研究对该地本轮黄鳍鲷流行病进行了调查,从自然发病黄鳍鲷的脑部分离病原菌,对分离菌株进行了形态学特征观察、生理生化特性检测、16S r DNA系统进化分析和血清型鉴定,确认了引起该疫病暴发的病原体为海豚链球菌。并进一步探究分离菌株ZH016的致
学位
电视剧是依托于视听语言的综合艺术,导演能够赋予其独特的美学价值和文化内涵。优秀导演对电视剧品质的提升起到举足轻重的作用。毛卫宁自觉承继中华美学精神,坚守现实主义创作传统,对革命历史和现实生活投入审美的关注,对人物给予理解性同情,创作出一批思想精深、艺术精湛、制作精良的电视剧。他引领反特类型复苏,执导了《誓言无声》《誓言永恒》《身份的证明》等高品质电视剧,深耕革命历史题材,创作了《十送红军》《功勋之
学位