【摘 要】
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磷酸三（2-丁氧基）乙酯（Tris（2-butoxyethyl）phosphate,TBOEP）作为一种被广泛应用于化学材料、电子通信、纺织、家具等行业的阻燃剂,在水体、空气、土壤及生物体中常被检测到。有研究表明TBOEP可在水生生物体内富集,并损伤其生殖、神经以及内分泌系统。TBOEP对雌性的毒性效应比雄性大,并能通过母体传递导致子代的发育毒性,但其分子机制仍不明确。先前的研究多为同时暴露雌性亲
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磷酸三（2-丁氧基）乙酯（Tris（2-butoxyethyl）phosphate,TBOEP）作为一种被广泛应用于化学材料、电子通信、纺织、家具等行业的阻燃剂,在水体、空气、土壤及生物体中常被检测到。有研究表明TBOEP可在水生生物体内富集,并损伤其生殖、神经以及内分泌系统。TBOEP对雌性的毒性效应比雄性大,并能通过母体传递导致子代的发育毒性,但其分子机制仍不明确。先前的研究多为同时暴露雌性亲本和雄性亲本,因此本实验仅将四月龄雌性斑马鱼单独暴露于TBOEP（0μg/L、20μg/L、100μg/L和500μg/L）中,观察其生殖损伤及其对子代斑马鱼的毒性效应。雌性斑马鱼30天暴露实验结束后与健康雄性斑马鱼于清水中产卵。通过检测F0代雌性斑马鱼卵巢中的TBOEP含量及卵黄蛋白含量,并观察卵巢病理组织学切片变化,来评估TBOEP对F0代雌性斑马鱼的影响;通过检测144 hpf（受精后小时数,hour post-fertilization）的子代仔鱼的生长发育基本指标,评估子代的生长发育毒性;并通过检测2 hpf的子代胚胎的直径、胚胎中的TBOEP含量及卵黄蛋白含量,以及144 hpf的子代仔鱼的生长激素/胰岛素样生长因子（growth hormone/insulin growth factors,GH/IGF）轴和下丘脑-垂体-甲状腺（hypothalamic-pituitary-thyroid,HPT）轴上相关基因表达量的变化,来探究母源性TBOEP暴露对子代斑马鱼的毒性机制。主要结果如下:1.100μg/L和500μg/L浓度组中,F0代雌鱼体重增长率显著降低,体长增长率无显著变化;性腺指数（gonad somatic index,GSI）显著降低。F0代卵巢病理组织学切片结果显示:20μg/L、100μg/L和500μg/L浓度组中,初级卵母细胞所占比例显著升高,成熟卵母细胞所占比例显著下降;100μg/L和500μg/L浓度组中,卵黄期卵母细胞所占比例显著下降。表明TBOEP延滞了雌性斑马鱼卵母细胞的成熟。且所有浓度组中,雌鱼卵巢中的卵黄蛋白含量显著降低。2.20 ug/L、100 ug/L和500 ug/L浓度组中,在F0代性腺中检测到了TBOEP,平均浓度分别为:13.12±0.69 ng/g湿重（ww）、63.46±11.02 ng/g ww和132.40±10.28 ng/g ww;同样在子代胚胎中检测到了TBOEP,平均浓度分别为:8.45±2.28 ng/g ww、13.80±0.95 ng/g ww和31.48±5.41ng/g ww。表明TBOEP能在F0代性腺中蓄积并随卵母细胞转移至子代。3.TBOEP单独暴露雌性斑马鱼后,其子代仔鱼的生长发育受到抑制。20μg/L、100μg/L和500μg/L浓度组中,子代仔鱼的体长显著减少;100μg/L和500μg/L浓度组中,子代仔鱼的心率显著降低;500μg/L浓度组中,子代仔鱼的存活率显著下降;20μg/L、100μg/L和500μg/L浓度组中,子代仔鱼的畸形率显著升高,500μg/L浓度组的畸形率较100μg/L浓度组有下降趋势,可能是由于500μg/L浓度组中死亡的畸形斑马鱼未计入其中,导致畸形率下降。另外,100μg/L和500μg/L浓度组中,子代胚胎的直径显著减少,子代胚胎中的卵黄蛋白含量也显著下降。且子代仔鱼GH/IGF轴和HPT轴上大多数基因的表达量显著下降。综上,TBOEP能够通过母体传递在胚胎中蓄积,通过延缓雌性斑马鱼卵母细胞的成熟并降低卵黄蛋白的含量,从而影响子代胚胎的直径、卵黄蛋白含量、GH/IGF轴及HPT轴上相关基因的表达,损伤子代斑马鱼的生长发育。
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