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目的:以成年SD雌性大鼠为实验对象,在造模成功后给予斑蝥素乳膏宫腔给药,研究斑蝥素乳膏对EH模型大鼠子宫内膜VEGF、HIF-1α的影响,揭露斑蝥素乳膏干预增生型子宫内膜大鼠的部分机制,为临床治疗及科研提供理论依据,并以期扩大新药斑蝥素乳膏的用药范围。
方法:1.选用健康成年的SD大鼠42只,随机分为假手术组、模型组、斑蝥素乳膏宫腔给药低浓度组和斑蝥素乳膏宫腔给药高浓度组。假手术组只行开关腹,术后常规抗炎处理3天。除假手术组外,其余3组均采用卵巢去势联合雌激素负荷法建立大鼠子宫内膜增生症模型,造模成功后模型组宫腔灌注生理盐水,低浓度组与高浓度组分别宫腔灌注0.3ml的低、高浓度的斑蝥素乳膏,3天及5天后处死动物留取子宫标本,使用HE染色观察子宫内膜厚度改变情况,WesternBlot检测VEGF、HIF-1α蛋白表达情况,免疫组化技术检测子宫内膜组织中VEGF、HIF-1α含量的变化情况。
结果:(1)HE染色显示:子宫内膜厚度:与假手术组相比,模型组子宫内膜厚度明显增厚,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,斑蝥素乳膏高、低剂量组(第3天处死)子宫内膜均降低,差异具有统计学意义,(P均<0.05);与模型组相比,斑蝥素乳膏高、低剂量组(第5天处死)子宫内膜厚度虽较模型组降低,但无明显统计学意义,(P均>0.05);斑蝥素乳膏组(第3天处死)高、低剂量组间子宫内膜厚度差异具有统计学意义(P<0.05),斑蝥素乳膏组(第5天处死)高、低剂量组子宫内膜厚度无明显差异(P>0.05)。(2)免疫组化结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠子宫内膜VEGF、HIF-1α阳性表达高,差异具有统计学意义,(P<0.05);与模型组相比,斑蝥素高、低剂量组(第3天处死)VEGF、HIF-1α阳性表达减少,差异具有统计学意义,(P<0.05),两组间VEGF、HIF-1α的阳性表达无明显统计学差异,(P>0.05);与模型组相比,斑蝥素高、低剂量组(第5天处死)VEGF、HIF-1α表达阳性率增加,无明显统计学差异,(P>0.05),两组间VEGF、HIF-1α的阳性表达无明显统计学差异,(P>0.05)。且对于VEGF与HIF-1α相关性分析得出两者在子宫内膜组织中的表达中存在相关关系。(3)WesternBlot结果显示:该药对大鼠子宫内膜增生模型细胞中VEGF、HIF-1α蛋白表达有不同程度下调作用,药物浓度与VEGF、HIF-1α蛋白下调呈正比。用药第3天后内膜组织VEGF/β-actin和HIF-1α/β-actin的表达量较用药前表达量比值小,差异显著,经检验证实有统计学意义(P<0.05)。但是用药第5天后内膜组织VEGF/β-actin和HIF-1α/β-actin的表达量较用药前表达量比值无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。随着用药时间以及剂量的变化,蛋白表达量有所变化,提示斑蝥素乳膏对增生型大鼠子宫内膜VEGF、HIF-1α蛋白表达的影响与时间和剂量有关。
结论:(1)斑蝥素乳膏可降低EH模型大鼠子宫内膜的厚度,说明斑蝥素乳膏对EH模型大鼠的子宫内膜具有一定的祛除作用,但作用效果随时间推移而降低,说明对于该药的剂型设计可向宫内缓释系统方向发展。(2)斑蝥素乳膏可减少EH模型大鼠子宫内膜组织中VEGF、HIF-1α蛋白的表达。其影响大鼠子宫内膜的生长可能与血管生成通路有关。
方法:1.选用健康成年的SD大鼠42只,随机分为假手术组、模型组、斑蝥素乳膏宫腔给药低浓度组和斑蝥素乳膏宫腔给药高浓度组。假手术组只行开关腹,术后常规抗炎处理3天。除假手术组外,其余3组均采用卵巢去势联合雌激素负荷法建立大鼠子宫内膜增生症模型,造模成功后模型组宫腔灌注生理盐水,低浓度组与高浓度组分别宫腔灌注0.3ml的低、高浓度的斑蝥素乳膏,3天及5天后处死动物留取子宫标本,使用HE染色观察子宫内膜厚度改变情况,WesternBlot检测VEGF、HIF-1α蛋白表达情况,免疫组化技术检测子宫内膜组织中VEGF、HIF-1α含量的变化情况。
结果:(1)HE染色显示:子宫内膜厚度:与假手术组相比,模型组子宫内膜厚度明显增厚,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,斑蝥素乳膏高、低剂量组(第3天处死)子宫内膜均降低,差异具有统计学意义,(P均<0.05);与模型组相比,斑蝥素乳膏高、低剂量组(第5天处死)子宫内膜厚度虽较模型组降低,但无明显统计学意义,(P均>0.05);斑蝥素乳膏组(第3天处死)高、低剂量组间子宫内膜厚度差异具有统计学意义(P<0.05),斑蝥素乳膏组(第5天处死)高、低剂量组子宫内膜厚度无明显差异(P>0.05)。(2)免疫组化结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠子宫内膜VEGF、HIF-1α阳性表达高,差异具有统计学意义,(P<0.05);与模型组相比,斑蝥素高、低剂量组(第3天处死)VEGF、HIF-1α阳性表达减少,差异具有统计学意义,(P<0.05),两组间VEGF、HIF-1α的阳性表达无明显统计学差异,(P>0.05);与模型组相比,斑蝥素高、低剂量组(第5天处死)VEGF、HIF-1α表达阳性率增加,无明显统计学差异,(P>0.05),两组间VEGF、HIF-1α的阳性表达无明显统计学差异,(P>0.05)。且对于VEGF与HIF-1α相关性分析得出两者在子宫内膜组织中的表达中存在相关关系。(3)WesternBlot结果显示:该药对大鼠子宫内膜增生模型细胞中VEGF、HIF-1α蛋白表达有不同程度下调作用,药物浓度与VEGF、HIF-1α蛋白下调呈正比。用药第3天后内膜组织VEGF/β-actin和HIF-1α/β-actin的表达量较用药前表达量比值小,差异显著,经检验证实有统计学意义(P<0.05)。但是用药第5天后内膜组织VEGF/β-actin和HIF-1α/β-actin的表达量较用药前表达量比值无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。随着用药时间以及剂量的变化,蛋白表达量有所变化,提示斑蝥素乳膏对增生型大鼠子宫内膜VEGF、HIF-1α蛋白表达的影响与时间和剂量有关。
结论:(1)斑蝥素乳膏可降低EH模型大鼠子宫内膜的厚度,说明斑蝥素乳膏对EH模型大鼠的子宫内膜具有一定的祛除作用,但作用效果随时间推移而降低,说明对于该药的剂型设计可向宫内缓释系统方向发展。(2)斑蝥素乳膏可减少EH模型大鼠子宫内膜组织中VEGF、HIF-1α蛋白的表达。其影响大鼠子宫内膜的生长可能与血管生成通路有关。