随着全球范围内出现人口老龄化现象的加重和诱导脑卒中发生发展危险因素的增多,导致大多数国家脑卒中患者的发病率、致死率和致残率显著增加,尽管在血管危险因素的早期诊断和有效治疗等方面已经取得一定进展,但仍旧给社会、家庭和患者带来不容忽视的伤害,成为健康中国行动中亟待解决的重要问题之一,其中大部分患者的病例类型为缺血性脑卒中（cerebral ischemic stroke,CIS）。使血液再通的治疗方法是缓解病情恶化的主要方式,血液恢复再灌注的过程中会表现出由许多不同原因引起的复杂病理生理机制,这些机制会导致损伤进一步加重,称为脑缺血/再灌注损伤（cerebral ischemia/reperfusion injury,CIRI）。其中,炎症反应在CIRI发生后发挥着至关重要的作用,过度的炎症级联反应会加重神经细胞死亡,导致缺血性脑组织产生炎性损伤。近年来随着翻译后修饰在基因表达调控中的深入研究,沉默信息调节因子1（silent information regulation 1,SIRT1）因为含有可以防止DNA损伤和促进DNA修复进而抵抗衰老的重要作用,作为组蛋白去乙酰化酶基因家族中的一种长寿蛋白得到关注,如今其通过发挥烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+）去乙酰化的活性作用在越来越多的心脑血管疾病中成为潜在的治疗靶标,其激活也可以被认为是一种重要的神经保护策略,可通过SIRT1/NF-κB p65信号通路干预炎症反应进而发挥保护作用。清朝著名医学家王清任所撰写的《医林改错·下卷·瘫痿论》一书中首次提出中药复方补阳还五汤,该方剂具有益补元气、活血祛瘀通络的作用,自古以来是治疗脑卒中气虚血瘀证的代表方剂沿用至今,现代药理学研究发现其对炎症反应具有显著的抑制作用,但复杂的作用机制尚未阐明。本实验通过利用SD大鼠进行在体动物实验,通过线栓法建立局灶性大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型模拟CIRI导致疾病的过程,探究补阳还五汤减轻该疾病的保护作用机理,整体研究总共分为两大部分:第一部分探讨补阳还五汤对大鼠CIRI后SIRT1蛋白表达影响的研究。第二部分探讨补阳还五汤通过激活SIRT1/NF-κB p65炎症信号通路减轻大鼠CIRI的研究。第一部分补阳还五汤对大鼠脑缺血/再灌注损伤SIRT1蛋白表达影响的研究目的:探讨补阳还五汤对大鼠脑缺血/再灌注损伤SIRT1蛋白表达的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组（Sham）、模型组（MCAO/R）、补阳还五汤组（BYHWT）、阳性对照药阿托伐他汀组（Atorvastatin）,每组15只。除Sham组外,MCAO/R组、BYHWT组、Atorvastatin组均建立大鼠MCAO模型缺血2 h再灌注72 h模拟CIRI,分别给予补阳还五汤和阿托伐他汀进行干预。应用激光散斑血流监测视频系统实时动态监测大鼠手术侧脑血流量的变化,以此标准评价模型制备成功。通过72 h的药物治疗干预后,采用Zea Longa神经功能学评分评价大鼠神经功能缺损情况;TTC染色检测脑梗死体积百分比;尼氏染色观察神经细胞损伤情况;Western Blot检测SIRT1蛋白表达水平;免疫荧光染色检测SIRT1荧光表达水平。结果:Sham组没有出现神经功能缺损和脑梗死现象,神经细胞形态正常、数量丰富;与Sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分增加,脑梗死体积百分比增加,神经细胞排列紊乱、数量减少,细胞核固缩,SIRT1蛋白的表达量减少以及荧光强度减弱（P＜0.05）;与MCAO/R组相比,BYHWT组和Atorvastatin组神经功能学评分降低,脑梗死体积百分比下降,神经细胞数量增多,SIRT1蛋白的表达量增加以及荧光强度增强（P＜0.05）。小结:补阳还五汤可降低CIRI大鼠神经功能学评分、减小脑梗死体积、增加SIRT1蛋白的表达量,减轻CIRI,该作用可能与补阳还五汤促进SIRT1蛋白表达增多有关。第二部分补阳还五汤通过调控SIRT1/NF-κB p65炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤的研究目的:探讨补阳还五汤通过调控SIRT1/NF-κB p65炎症信号通路减轻大鼠CIRI的研究。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组（Sham）、模型组（MCAO/R）、补阳还五汤组（BYHWT）、SIRT1抑制剂组（EX527）、补阳还五汤+SIRT1抑制剂组（BYHWT+EX527）,每组15只。除Sham组外,MCAO/R组、BYHWT组、EX527组、BYHWT+EX527组均建立大鼠MCAO模型缺血2 h再灌注72 h模拟CIRI,分别给予补阳还五汤和SIRT1抑制剂EX527进行干预。选取模型制备成功的大鼠,采用Zea Longa神经功能学评分评价大鼠神经功能缺损情况;TTC染色检测脑梗死体积百分比;Western Blot检测SIRT1、Ac NF-κB p65、NF-κB p65、IL-6蛋白的相对表达量;免疫荧光染色检测NF-κB p65入核表达情况;免疫组化染色检测TNF-α阳性表达水平。结果:Sham组没有出现神经功能缺损和脑梗死现象,脑组织内无活性的NF-κB p65主要表达于细胞浆中。与Sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分增加,脑梗死体积百分比增加,SIRT1蛋白的表达量减少,Ac NF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白的表达量升高,缺血侧脑组织NF-κB p65主要表达于细胞核中被激活,免疫组化显示TNF-α阳性表达量显著升高（P＜0.05）。与MCAO/R组相比,BYHWT组神经功能学评分降低,脑梗死体积百分比减小,SIRT1蛋白的表达量增加,Ac NF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白的表达量减少,细胞浆和细胞核中NF-κB p65均有表达,免疫组化显示TNF-α阳性表达量有所降低;EX527组大鼠神经功能学评分增加,脑梗死体积百分比增加,SIRT1蛋白的表达量减少,Ac NF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白的表达量升高,细胞核中NF-κB p65表达相对较多,免疫组化显示TNF-α阳性表达量增加（P＜0.05）。与BYHWT组相比,BYHWT+EX527组大鼠神经功能学评分增加,脑梗死体积百分比增加,SIRT1蛋白的表达量减少,Ac NF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白的表达量升高,细胞核中NF-κB p65表达相对较多,免疫组化显示TNF-α阳性表达量增加（P＜0.05）。小结:补阳还五汤可增加CIRI大鼠SIRT1蛋白的表达、降低Ac NF-κB p65/NF-κB p65和IL-6及TNF-α表达,减轻大鼠CIRI发挥保护作用。结论:补阳还五汤可减轻大鼠CIRI,该作用是通过激活SIRT1/NF-κB p65信号通路,从而抑制炎症反应来实现的。