【摘 要】
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目的:本研究旨在制备人心肌细胞外基质-壳聚糖-明胶复合（c ECM-CG）的心脏补片支架材料并研究其内皮化特点。方法:本实验通过脱细胞过程制备人心肌细胞外基质（c ECM）,然后将c ECM与壳聚糖-明胶混合物（CG）混合,冷冻干燥制备c ECMCG复合支架材料。分析c ECM的组成及支架材料的特点。通过q RTPCR及小管形成实验研究种植在支架材料上的CD34+内皮祖细胞（EPCs）向内皮细胞的
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目的:本研究旨在制备人心肌细胞外基质-壳聚糖-明胶复合（c ECM-CG）的心脏补片支架材料并研究其内皮化特点。方法:本实验通过脱细胞过程制备人心肌细胞外基质（c ECM）,然后将c ECM与壳聚糖-明胶混合物（CG）混合,冷冻干燥制备c ECMCG复合支架材料。分析c ECM的组成及支架材料的特点。通过q RTPCR及小管形成实验研究种植在支架材料上的CD34+内皮祖细胞（EPCs）向内皮细胞的分化情况,研究支架材料的内皮化。通过质谱分析检测了支架材料中促进内皮化的蛋白。结果:染色结果表明,心肌组织脱细胞完全,且脱细胞后ECM中的主要成分保留较完整。c ECM-CG复合支架材料上的细胞生长增殖较CG支架材料组更显著（P＜0.05）,进一步证实含有c ECM的支架材料具有较好生物相容性。电镜结果显示c ECM-CG复合支架材料是三维多孔状的支架材料。吸水性实验结果显示c ECM-CG支架材料具有较好的吸水性。q RT-PCR结果表明CD34+EPCs可以分化为内皮细胞,CD31、v WF和CD144的m RNA表达在c ECM-CG支架材料组更显著（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001）。c ECM-CG支架材料上培养的CD34+EPCs的条件培养基较CG组具有更加明显的促进内皮细胞小管形成的作用（P＜0.05）。质谱分析结果显示c ECM-CG复合支架材料中存在一些与内皮化相关的蛋白。结论:本实验利用小儿心肌细胞外基质、天然可降解材料壳聚糖和明胶制备出一种新型c ECM-CG复合支架材料,可以模仿天然细胞外基质环境,具有三维多孔性、可降解性、免疫原性低、细胞相容性好等较适合细胞生长的形态及生物学特点。通过与CD34+EPCs复合,可以促进支架材料的内皮化形成。
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