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目的:探讨迷迭香酸（rosmarinic acid,RA）通过影响补体3/补体3 a受体（Complement 3/Complement 3a receptor,C3/C3a R）信号表达调控小胶质细胞激活和神经炎症反应对阿尔茨海默症（Alzheimer disease,AD）小鼠记忆障碍的作用及其药理机制。方法:（1）在体内实验中,采用SPF级3月龄Presenilin 1/2条件性双基因敲除（Presenilins conditional double knockout,PS c DKO）AD模式小鼠及其同窝野生型小鼠,雌雄各半,随机双盲分为同窝野生型组（Wildtype,WT,n=15）、野生型+迷迭香酸组（WT+RA,n=15）、PS c DKO组（c DKO,n=15）、PS c DKO+迷迭香酸组（c DKO+RA,n=15）,WT组和PS c DKO组小鼠用正常饲料进行饲养,WT+RA组和PS c DKO+RA组小鼠用含有RA（100 ppm）的饲料进行饲养,RA治疗60 d后进行行为学检测（包括旷场实验、新异物体识别实验、Y迷宫、Morris水迷宫和条件性恐惧实验）,共30 d,并持续给予RA治疗。行为学结束后采用离体脑片场电位记录技术,记录各组小鼠HPC谢弗侧枝CA1（Schafer collateral-CA1,SC-CA1）区突触传递和长时程增强（long-term potentiation,LTP）的变化。ELISA检测各组小鼠海马（hippocampus,HPC）中肿瘤坏死因子-α（tumor putrescence factor-α,TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的含量。q RT-PCR测定各组小鼠HPC和前额皮质（prefrontal cortex,PFC）中补体C3、受体C3a R和促炎症因子一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,i NOS）、环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、TNF-α、IL-1β、白介素-6（interleukin-6,IL-6）的m RNA表达;Western blot测定各组小鼠HPC和PFC中补体C3、C3a R、i NOS、COX-2和相关突触蛋白N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR）（NR1,NR2A,NR2B）、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸受体（amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid receptor,AMPAR）（Glu R1,Glu R2）、突触后密度蛋白（postsynaptic density protein-95,PSD-95）、微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2,MAP2）、突触素（synaptophysin,SYP）的表达。（2）在体外实验中,培养SD大鼠原代小胶质细胞,MTT实验检测不同浓度的RA（0.3μM-80μM）对于原代小胶质细胞活性的影响。采用Griess试剂检测不同浓度的RA（0.3μM-80μM）干预对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激原代小胶质细胞产生的一氧化氮（nitric oxide,NO）产物量的影响。原代小胶质细胞共分为四组:正常对照组（Control,Ctrl）、正常对照+迷迭香酸组（Ctrl+RA）、脂多糖组（LPS）和脂多糖+迷迭香酸组（LPS+RA）,Western blot检测了6个时间点（2 h,4 h,6 h,12 h,16 h,24 h）的RA对LPS刺激小胶质细胞后C3a R蛋白表达及8个时间点（0.5 h,1 h,2 h,4 h,6 h,12 h,16 h,24 h）的RA对LPS刺激小胶质细胞后i NOS和COX-2蛋白表达的影响。慢病毒包装及转染C3a R干扰质粒,共分为7组:正常对照组（Control,Ctrl）、补体3组（Complement 3,C3）,补体3+迷迭香酸组（C3+RA）,补体3+干扰质粒组（C3+sh RNA）,补体3+干扰质粒+迷迭香酸组（C3+sh RNA+RA）,补体3+对照质粒组（C3+EV）和正常对照+对照质粒组（Ctrl+EV）。Western blot检测加入C3 24 h后C3a R和COX-2、i NOS的蛋白表达。结果:（1）在旷场实验中,RA没有改变PS c DKO小鼠的活动时间及活动距离,说明RA并不会影响PS c DKO小鼠的自发运动能力;新异物体识别实验显示在1 h测试中PS c DKO小鼠较WT小鼠花费更少的时间探索新物体,RA治疗后增加PS c DKO小鼠对新物体的偏好,说明RA可以改善PS c DKO小鼠的短期记忆受损;Y迷宫实验显示,PS c DKO小鼠较WT小鼠在闭合臂逗留的频率和时间均降低,而PS c DKO+RA小鼠在闭合臂逗留的频率和时间较PS c DKO小鼠均增加,说明RA能改善PS c DKO小鼠空间记忆能力。Morris水迷宫实验结果显示,PS c DKO小鼠的逃避潜伏期明显高于WT小鼠,RA治疗后显著降低了PS c DKO小鼠的逃避潜伏期;在去平台测试期间,PS c DKO小鼠在目标象限活动的距离和时间及穿越目标象限的次数与WT小鼠相比显著降低,RA治疗后PS c DKO小鼠在目标象限的活动偏好显著提高。说明RA改善PS c DKO小鼠的空间参考记忆障碍。条件性恐惧任务结果显示PS c DKO小鼠的僵直时间百分比明显低于WT小鼠,而PS c DKO小鼠接受RA治疗后僵直时间显著增高,说明RA改善PS c DKO小鼠的联合记忆障碍。（2）离体脑片的场电位记录结果表明,在不同的刺激强度下,四组小鼠的兴奋性突触后场电位（field excitatory postsynaptic potential,f EPSPs）斜率相似,表明PS c DKO小鼠在有或无RA治疗的情况下对SC-CA1的基础突触传递均没有产生影响。与WT小鼠相比,PS c DKO组小鼠中由高频刺激（high frequency stimulus,HFS）诱导引起的LTP明显降低。而RA治疗能够改善由HFS诱导引起的PS c DKO小鼠降低的LTP,表明RA治疗能够改善PS c DKO小鼠受损的突触可塑性。（3）Western blot结果显示PS c DKO小鼠较WT小鼠HPC和PFC中C3、C3a R及COX-2、i NOS的表达水平均显著增高,RA治疗后PS c DKO小鼠HPC和PFC中C3、C3a R及COX-2、i NOS的表达水平被逆转说明RA抑制PS c DKO小鼠HPC和PFC中补体C3、C3a R的表达及神经炎症反应。q RT-PCR结果显示RA显著降低PS c DKO小鼠HPC和PFC中促炎症因子COX-2、i NOS以及TNF-α、IL-1β、IL-6 m RNA表达;ELISA结果显示RA显著降低PS c DKO小鼠HPC中TNF-α和IL-1β的表达量。q RT-PCR和ELISA结果说明RA可以抑制PS c DKO小鼠的神经炎症反应。Western blot检测HPC和PFC突触蛋白的表达结果显示,PS c DKO小鼠较WT小鼠HPC和PFC中NMDARs（NR2A、NR2B、NR1）及突触功能相关的PSD-95、SYP、MAP2蛋白的表达水平显著降低,RA治疗后逆转了NMDARs及PSD-95、SYP、MAP2的低表达水平,但对AMPAR蛋白表达水平无影响。说明RA能够改善突触功能障碍及神经元突触损伤。（4）MTT实验结果显示,在有无LPS刺激的前提下,RA（0.3-80μM）对原代小胶质细胞的活性均无影响,说明RA对原代小胶质细胞无毒性作用。NO实验结果显示LPS刺激原代小胶质细胞后,RA（0.3-80μM）预处理明显降低细胞培养液中NO产物的生成量并且呈现出剂量依赖性。Western blot结果显示,Ctrl+RA组与Ctrl组相比,在6个时间点中均无明显差异,但在加入LPS 12 h后C3a R开始显著性表达,在24 h时C3a R表达量达到最高,加入RA干预后,C3a R表达量显著性降低。LPS刺激原代小胶质细胞24 h后相较于Ctrl组,COX-2和i NOS蛋白表达量显著提高,加RA（10μM）干预后COX-2和i NOS蛋白表达量显著降低。慢病毒转染后Western blot结果显示C3组相比与Ctrl组C3a R和COX-2、i NOS表达水平显著升高,加RA干预后C3a R和COX-2、i NOS表达被显著抑制。同时在C3+sh RNA组观察到与C3+sh RNA+RA组,C3+RA组相似的COX-2、i NOS表达水平,说明RA通过抑制C3a R降低了促炎因子COX-2和i NOS的表达。结论:（1）迷迭香酸可以通过抑制补体C3/C3a R的表达,下调HPC和PFC小胶质细胞激活导致的促炎症因子释放从而改善PS c DKO小鼠神经炎症反应。（2）迷迭香酸具有通过抑制神经炎症反应逆转PS c DKO小鼠HPC和PFC的突触可塑性损伤改善记忆障碍的作用。（3）离体实验证实迷迭香酸通过抑制补体C3/C3a R的表达改善LPS诱导的小胶质细胞的激活和炎症反应。