【摘 要】
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一、目的检测lnc RNA TP73-AS1在胰腺癌组织以及细胞系中的表达水平,分析其与临床病理资料的相关性。进一步探讨TP73-AS1在胰腺癌发生发展过程中的作用及相关机制。二、材料与方法首先检测了TP73-AS1在人胰管上皮细胞系（H6C7）以及另外5种胰腺癌细胞株中的表达,随后检测了其在116例胰腺癌组织及对应癌旁组织中的表达水平。体外研究采用CCK-8实验、克隆形成实验检测了干扰内源性TP
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一、目的检测lnc RNA TP73-AS1在胰腺癌组织以及细胞系中的表达水平,分析其与临床病理资料的相关性。进一步探讨TP73-AS1在胰腺癌发生发展过程中的作用及相关机制。二、材料与方法首先检测了TP73-AS1在人胰管上皮细胞系（H6C7）以及另外5种胰腺癌细胞株中的表达,随后检测了其在116例胰腺癌组织及对应癌旁组织中的表达水平。体外研究采用CCK-8实验、克隆形成实验检测了干扰内源性TP73-AS1表达后细胞增殖能力的改变;流式细胞术分析了下调TP73-AS1后胰腺癌细胞的凋亡改变;同时使用了Transwell实验分析了干扰TP73-AS1后细胞的侵袭能力的变化。利用生物信息学发现TP73-AS1作为miRNA-128-3p的一个竞争性内源性RNA（competing endogenous RNAs,ce RNA）调控GOLM1的表达。体内裸鼠成瘤实验评估TP73-AS1在肿瘤生长和转移过程中的重要角色,同时检测移植瘤组织内增殖标记物（Ki-67染色）的表达。三、结果1.TP73-AS1在胰腺癌组织和细胞中显著上调实时定量PCR技术检测显示,与H6C7细胞相比,TP73-AS1在胰腺癌细胞株中显著上调;随后胰腺癌组织以及对应癌旁组织中的表达结果显示TP73-AS1在胰腺癌组织中上调,并与肿瘤大小、血管浸润、TNM分期以及总生存率相关。2.体外实验探讨TP73-AS1的生物学功能CCK-8实验及克隆形成实验检测发现,干扰内源性TP73-AS1的表达后可抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭;流式细胞术检测发现,干扰内源性TP73-AS1的表达后胰腺癌细胞的凋亡水平上升。3.TP73-AS1通过调节miRNA-128-3p的表达正向调控GOLM1生物信息学以及双荧光素酶报告基因分析证实TP73-AS1与GOLM1可作为miR-128-3p的靶基因,回补实验发现TP73-AS1通过充当miR-128-3p的ce RNA,以调控GOLM1的表达来促进胰腺癌的进展。4.敲低TP73-AS1可减弱小鼠成瘤和转移能力体内实验结果表明,沉默TP73-AS1可明显减小肿瘤生长体积。此外,移植瘤组织免疫组化染色分析发现沉默TP73-AS1后的移植瘤组织中Ki-67染色明显减少。同时沉默TP73-AS1可显著减少肺转移的发生。四、结论1、胰腺癌组织中TP73-AS1表达呈显著上调,其作为原癌基因发挥作用;2、敲低TP73-AS1能通过影响细胞凋亡来抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭;3、分子机制表明TP73-AS1通过充当miR-128-3p的ce RNA,从而调控GOLM1的表达来促进胰腺癌的进展。
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