【摘 要】
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目的神经病理性疼痛是一种机制复杂的慢性疼痛,目前的治疗方法对慢性疼痛患者的治疗效果有限。本课题欲探究Schnurri-2（Shn2）在神经病理性疼痛的作用和潜在的分子机制。方法选取6周龄Vglut2::AI3和GAD::AI14转基因小鼠各5只,处死小鼠并迅速取出L4-L6段脊髓腰膨大,用免疫组织化学方法检测Shn2在脊髓背角兴奋性和抑制性神经元的表达分布;选取6周龄C57BL/6J雄性鼠5只,处
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目的神经病理性疼痛是一种机制复杂的慢性疼痛,目前的治疗方法对慢性疼痛患者的治疗效果有限。本课题欲探究Schnurri-2（Shn2）在神经病理性疼痛的作用和潜在的分子机制。方法选取6周龄Vglut2::AI3和GAD::AI14转基因小鼠各5只,处死小鼠并迅速取出L4-L6段脊髓腰膨大,用免疫组织化学方法检测Shn2在脊髓背角兴奋性和抑制性神经元的表达分布;选取6周龄C57BL/6J雄性鼠5只,处死小鼠并迅速取出L4-L6段脊髓腰膨大,用免疫组织化学方法检测Shn2与Glu N2D的共定位情况;选取6周龄C57BL/6J雄性鼠60只,随机均分为四组:对照组（Sham）、神经病理性疼痛组（SNI）、神经病理性疼痛组+阴性对照病毒组（SNI+CON-LV）、神经病理性疼痛组+干扰病毒组（SNI+Shn2-LV）,每组15只小鼠。Sham组仅暴露右侧大腿坐骨神经后即缝合,SNI组右侧大腿行坐骨神经分支选择性损伤后构建SNI模型,SNI+CON-LV组和SNI+Shn2-LV组在构建SNI模型之后的第7天,分别于脊髓背角注射CON-LV和Shn2-LV慢病毒。第0、3、7、8、10、12、14、18、21天分别测定各组小鼠足底机械疼痛阈值（Paw withdrawal threshold,PWT）。术后第21天处死小鼠并迅速取出L4-L6段脊髓腰膨大,用RT-PCR和Western blot检测脊髓中Shn2、Glu R1、Glu N2D的含量;免疫组化检测Shn2、Glu R1、Glu N2D在脊髓背角的定位情况。结果脊髓背角中兴奋性和抑制性神经元均表达Shn2。所有小鼠的基础PWT都相同;术后第3天开始,与Sham组比,SNI组小鼠PWT明显下降（P＜0.05）,一直持续到术后第21天;与SNI组相比,SNI+CON-LV组小鼠PWT未发生明显改变（P＞0.05）,而SNI+Sh2-LV组小鼠PWT从第10天开始明显比SNI组高（P＜0.05）,一直持续到术后第21天。免疫组化结果显示Shn2、Glu R1、Glu N2D定位于SNI小鼠脊髓背角,且表达均上调。定量分析结果显示:在术后第21天,与Sham组相比,Shn2在SNI组小鼠脊髓背角表达升高（P＜0.05）;与SNI+CON-LV组相比,Shn2表达在SNI+Shn2-LV组中降低（P＜0.05）。与Sham组相比,Glu R1和Glu N2D在SNI组小鼠脊髓背角中表达均升高（P＜0.05）;与SNI+CON-LV组比,Glu R1和Glu N2D在SNI+Shn2-LV组脊髓背角中表达降低（P＜0.05）。结论本课题研究发现,Shn2可以促进谷氨酸能神经元中Glu N2D的上调,增加兴奋性神经元中Glu R1的积累并且调节神经病理性疼痛。
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