【摘 要】
：
BTG4是BTG/Tob家族中最后一个被克隆的成员,关于其的研究很少。研究表明BTG4在小鼠母体-合子过渡时期中对母体mRNAs的降解起着关键作用,而且在胃癌等肿瘤中表达下调。然而关于BTG4的调控机制及其在肿瘤中的作用至今尚不明确。本文鉴定了BTG4的启动子区域,并进一步研究p53对BTG4的调控作用,并揭示了BTG4在肿瘤增殖、迁移以及细胞凋亡中发挥的作用。(1)BTG4启动子区域的鉴定在本文
论文部分内容阅读
BTG4是BTG/Tob家族中最后一个被克隆的成员,关于其的研究很少。研究表明BTG4在小鼠母体-合子过渡时期中对母体mRNAs的降解起着关键作用,而且在胃癌等肿瘤中表达下调。然而关于BTG4的调控机制及其在肿瘤中的作用至今尚不明确。本文鉴定了BTG4的启动子区域,并进一步研究p53对BTG4的调控作用,并揭示了BTG4在肿瘤增殖、迁移以及细胞凋亡中发挥的作用。(1)BTG4启动子区域的鉴定在本文中,我们首次鉴定了人类BTG4的启动子区域。并且构建了不同长度的BTG4启动子载体BTG4-P1837(-1611/+226),BTG4-P647(-421/+226),BTG4-P412(-421/-9),和BTG4-P388(-397/-9),在HCT116与H1299细胞中进行双荧光素酶报告实验来检测这几个BTG4启动子的活性,结果显示BTG4-P388(-397/-9)活性最强,而与BTG4-P412(-421/-9)重合的miR-34b和miR-34c启动子也显示出较高的启动子活性,这表明BTG4的核心启动子区域位于其转录起始位点上游412bp区域内。(2)BTG4启动子区域中Sp1结合位点功能分析我们用MatInspector在线软件对BTG4启动子区域进行转录因子结合位点预测,预测结果显示BTG4启动子区域内有经典的转录因子比如Sp1结合位点。过表达Sp1后检测BTG4启动子活性变化,实验结果表明Sp1对BTG4启动子活性几乎没有影响,而且对BTG4启动子区域内的Sp1结合位点进行点突变,实验结果进一步表明Sp1在BTG4的转录调节过程中不是关键转录因子。(3)BTG4第一个内含子区域的p53的应答元件对p53的应答我们对BTG4全序列分析发现,在BTG4第一个内含子内包含两个重叠的保守的p53结合位点。因此我们构建了分别含有BTG4这两个p53结合位点的BTG4启动子载体,值得注意的是双荧光素酶报告实验表明BTG4内含子内的一个p53结合位点对p53高度应答。(4)p53在转录水平调控BTG4H1299细胞转染p53过表达载体,外源性p53过表达检测对BTG4的影响,结果显示BTG4转录上调,以及用阿霉素(ADR)处理HCT116和A549细胞(阿霉素(ADR)可激活p53的表达),这暗示着内源性p53的激活也可上调BTG4的mRNA水平。内源性与外源性p53过表达后实验结果表明p53可调节BTG4的转录。(5)BTG4对肿瘤的影响对肿瘤组织进行RT-PCR检测,结果发现BTG4在肺癌和结直肠癌中表达下调,而且划痕实验表明BTG4可以抑制细胞迁移,CCK8实验显示BTG4可抑制肿瘤细胞的增殖,在HCT116细胞中过表达BTG4后进行流式细胞检测,结果发现BTG4过表达可促进肿瘤细胞凋亡。综上所述,我们用双荧光素酶实验鉴定了BTG4的启动子区域,同时证实了转录因子Sp1不能调控BTG4的表达,我们实验结果强烈表明BTG4是一个新的p53调控基因,p53可在转录水平调控BTG4的表达,BTG4可能在肺癌和结直肠癌中起抑癌作用以及促进细胞凋亡。本研究对于深入系统研究BTG4的表达调控机制及其功能、进一步拓展对于p53功能的认识、以及深入探索BTG4在结肠癌等恶性肿瘤中的功能和靶向诊疗价值具有积极的理论和现实意义。
其他文献
面对反应装甲技术的不断提高,反“反应装甲”技术成为研究的热点之一,串联战斗部技术作为反“反应装甲”的有效技术,国内外专家和学者不断的将新结构和新材料应用到串联战斗部技术中。本文对串联战斗部侵彻斜置反应装甲目标开展研究,将低密度射流技术应用到串联战斗部前级,在串联战斗部前级低密度射流侵彻斜置反应装甲穿而不爆的基础上,避免了斜置反应装甲爆炸对串联战斗部后级射流的干扰,最大限度的发挥后级射流对主靶板的侵
N1区J层油藏包括J1、J2、J3三个层段。目前开发层段为J2层,经过多年热采开发,已进入开发中后期,开发效果日渐变差,如何进一步提高采收率成为亟待解决的问题。J1层未形成注采
纤维增强复合材料(FRP)已被广泛应用于砌体结构的加固和修复,但FRP的剥离破坏很大程度的限制了FRP强度的充分发挥,适当的锚固措施能有效的延缓甚至阻止剥离破坏的发生,增强加
背景海洋生境中蕴含着丰富的具有特殊功能的微生物资源和酶资源。琼胶酶就是一类主要由海洋微生物产生的糖苷水解酶。由于琼胶酶可水解琼脂糖产生具有特殊生物活性的琼胶寡糖,使其在食品、医药、化妆品、日用化工和科学研究等领域极具应用潜力。而现有琼胶酶水解效率低、稳定性差,极大限制了其应用。目的为增加琼胶酶种类,丰富现有琼胶酶资源,本论文从海洋环境中分离纯化可培养细菌,筛选产琼胶酶菌株,采用基因组学和分泌组学相
推理能力是智力的一个重要组成部分,常被用作流体智力的一个重要测量指标。测量推理能力的测验有多种形式,如文字、数字或图形推理等,其中图形推理测验以其跨文化、跨民族等优势在世界范围内被广泛应用。本次研究目的是在借鉴国内外优秀图形推理测验的基础上,编制一个适用于中学生的图形推理测验(Figure Reasoning Test for Middle School Students,简称FRT),以准确地评
本论文采用简单绿色的合成方法,成功制备了导电碳材料均匀包覆的球形Cr2O3/C复合材料、互相交织的纤维构筑的多孔网络结构的Cr2O3/氮掺杂碳（Cr2O3/NC）复合材料以及导电聚合物聚
随着经济全球化时代的到来,中国在国际上的影响力不断扩大,为了让世界各国全面地了解中国,我国实行语言和文化“走出去”战略,在世界各地建立孔子学院,加快汉语和中国优秀文化传播与推广。语言和文化相互依存,语言教学与文化教学也密不可分。使用一门外语顺利完成跨文化交际,不仅要掌握基本的语言知识技能,更需要深入地了解和学习隐藏于语言背后的文化。本文将巴基斯坦卡拉奇孔子学院(以下简称卡大孔院)的中国文化课程现状
交错桁架钢框架是一种新型结构形式,能提供两个柱距的大空间,具有很好的经济性,这符合我国建筑钢结构的发展方向。以往的研究结果表明,在循环荷载作用下,交错桁架钢框架塑性
本论文主要采用液相化学法控制合成TiO2基纳米棒阵列材料。分别从阵列材料的制备、形成机理以及性质表征几个方面进行论述。全文旨在探索液相体系中新型阵列结构材料组装与性
目的:探索IgA肾病合并血脂异常患者的临床及病理特点。方法:选取2014年1月至2019年7月于重庆医科大学附属第一医院经肾活检确诊为IgA肾病的患者共366例。按血脂水平将患者分为:1.血脂异常组及血脂正常组;2.高TC组及TC正常组;3.高TG组及TG正常组;4.LDL-C<1.8mmol/L组,1.8mmol/L≤LDL-C<2.6mmol/L组,2.6mmol/L≤LDL-C&