背景:造血重编程不仅对临床应用有着非常好的前景和重要的意义,其最终目标是可以提供功能性造血干细胞用于血液疾病的治疗,并且提供了不同的维度去理解造血机制。化合物的组合可以诱导已分化的成熟血细胞重编程为造血干祖细胞,这对于今后的临床应用有着巨大的现实意义。CellTagging细胞标记技术是一项新的可以对细胞命运变化进行示踪的技术。单细胞测序技术是近年来发展起来的一项新兴技术,其可以高通量地对细胞的转录组进行测序,基于此特点可以对细胞的异质性有着全面和透彻的研究。将CellTagging细胞标记技术和单细胞测序技术结合可以更好地窥探造血重编程过程中的轨迹变化。方法:首先将小鼠骨髓细胞中的有核细胞感染上细胞标签（CellTag）version 1病毒颗粒,在标记上细胞标签后,对所有细胞进行增殖,将其中一部分细胞作为第一个时间点的标本进行单细胞测序,剩下的细胞被重新置入放有化合物组合成分（VPA,CHIR99021,Repsox）的培养基中,进行造血重编程。将造血重编程细胞作为第二个时间点的标本进行单细胞测序。在两个时间点的单细胞测序数据中,根据8个碱基的随机细胞标签条码,找到细胞之间的对应关系。CellRanger上游分析之后,运用Seurat算法对细胞进行降维聚类,运用Scanpy及PAGA算法对造血重编程进行轨迹分析并对细胞基因表达进行分析。结果:在化合物组合诱导小鼠骨髓细胞重编程之后,运用CellTagging细胞标记技术和单细胞测序技术,发现在所有已分化血细胞中,诱导产生的造血干祖样细胞主要来自于中性粒细胞,并且建立了中性粒细胞造血重编程的轨迹图谱。中性粒细胞造血重编程过程中的诱导细胞类型包括成熟中性粒细胞,非成熟中性粒细胞,中性粒细胞前体,粒单核祖细胞,巨核红系祖细胞,普通髓系祖细胞,造血干祖细胞。其中的轨迹变化路径,可能是一个状态接着一个状态的转变,也可能是跳过某一个或某几个的状态直接转变。Scanpy和PAGA算法对化合物组合诱导中性粒细重编程做出了精准的轨迹图谱分析。结论:VPA联合Repsox及CHIR99021的化合物组合可以诱导中性粒细胞重编程为多能祖细胞,Scanpy及PAGA算法可以通过单细胞测序数据建立中性粒细胞造血重编程的轨迹图谱。