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目的:通过应用干酵母致大鼠发热,分别给予发热大鼠灌牛黄清心散、布洛芬及牛黄清心散合布洛芬后,观察大鼠各时段体温变化,并在给药一周后检测发热大鼠血清中cTnI含量及镜下观察肝组织的变化,以观察其对血清cTnI及肝脏的影响,从而指导临床在退热药选用时更加合理、安全、规范。
方法:(1)动物分组:将纳入实验的50只大鼠于实验动物中心适应性喂养7天,每天测定其基础体温,待体温稳定后通过随机数字表法分为5组,每组10只,即A组:空白对照组;B组:发热模型组;C组:牛黄清心散组;D组:布洛芬组;E组:牛黄清心散合布洛芬组。(2)造模:除空白对照组外,其余组均于大鼠背部皮下注射10%酵母混悬液1ml/kg,建立大鼠发热模型,空白组给予等量生理盐水。注射酵母3h后体温上升0.8℃以上者,为造模成功。(3)灌胃、取血与切片:A组予以灌胃2ml生理盐水;B组予以灌胃2ml生理盐水;C组予以灌胃小儿牛黄清心散0.1875g/次,第一天给药1次,之后6天连续用药,每天3次,每次用量同首次;D组予以布洛芬灌胃3ml,第一天给药1次,之后6天连续用药,每天3次,每次用量同首次;E组同时予以布洛芬与小儿牛黄清心散灌胃,两药用量及频率同前。连续灌胃1周后,于末次灌胃结束6小时后对各组大鼠进行摘眼球取血,血清采集完成后取出大鼠肝脏,固定、包埋、切片及染色处理。(4)指标检测:根据酶联免疫吸附测定方法(ELISA),检测各组大鼠血清中cTnI的水平;取各组大鼠肝脏同一位置组织制作苏木精-伊红(HE)染色病理切片,利用显微镜观察各组大鼠肝脏组织形态学的变化。
结果:(1)各组对发热大鼠体温的影响:模型组与空白组比较:3h后模型组大鼠均出现体温升高,且体温呈平稳上升趋势,提示10%干酵母混悬液皮下注射的方法可以成功的制造大鼠发热模型;(2)给药后,各组体温变化:牛黄清心散组、布洛芬组及两药合用组大鼠体温均可不同程度降低,(P>0.05),差异有统计学意义,其中牛黄清心散组灌胃3h后开始起效,布洛芬组灌胃1h后开始起效,牛黄清心散与布洛芬合用组起效时间与布洛芬组基本相同,在退热维持时间上,三组基本相同,(P>0.05),差异无统计学意义。(3)各组对发热大鼠血清中cTnI含量的影响:各组相比,血清中cTnI水平轻微波动(P>0.05),差异无统计学意义。(4)牛黄清心散合布洛芬对大鼠肝脏的影响:在10×10倍的光学显微镜下观察各组肝脏切片发现,肝组织结构清晰,肝细胞大小均匀,无变性、坏死,肝小叶结构完整,形态正常,小叶内肝细胞索排列整齐,局部有少量胶原着色,肝细胞较正常肝细胞未见明显变化。
结论:(1)造模成功后,大鼠体温开始升高,体温可维持9h;(2)牛黄清心散与布洛芬都具有降低体温的作用,起效时间不同,但维持时间相当,提示临床在退热时可于服用布洛芬3h后再服用牛黄清心散,可延长退热时间;(3)牛黄清心散与布洛芬合用对肝脏无明显影响,可快速持续降温,无毒副作用;(4)牛黄清心散与布洛芬合用对心肌肌钙蛋白影响不大,但对心肌细胞的损害尚待进一步研究。
方法:(1)动物分组:将纳入实验的50只大鼠于实验动物中心适应性喂养7天,每天测定其基础体温,待体温稳定后通过随机数字表法分为5组,每组10只,即A组:空白对照组;B组:发热模型组;C组:牛黄清心散组;D组:布洛芬组;E组:牛黄清心散合布洛芬组。(2)造模:除空白对照组外,其余组均于大鼠背部皮下注射10%酵母混悬液1ml/kg,建立大鼠发热模型,空白组给予等量生理盐水。注射酵母3h后体温上升0.8℃以上者,为造模成功。(3)灌胃、取血与切片:A组予以灌胃2ml生理盐水;B组予以灌胃2ml生理盐水;C组予以灌胃小儿牛黄清心散0.1875g/次,第一天给药1次,之后6天连续用药,每天3次,每次用量同首次;D组予以布洛芬灌胃3ml,第一天给药1次,之后6天连续用药,每天3次,每次用量同首次;E组同时予以布洛芬与小儿牛黄清心散灌胃,两药用量及频率同前。连续灌胃1周后,于末次灌胃结束6小时后对各组大鼠进行摘眼球取血,血清采集完成后取出大鼠肝脏,固定、包埋、切片及染色处理。(4)指标检测:根据酶联免疫吸附测定方法(ELISA),检测各组大鼠血清中cTnI的水平;取各组大鼠肝脏同一位置组织制作苏木精-伊红(HE)染色病理切片,利用显微镜观察各组大鼠肝脏组织形态学的变化。
结果:(1)各组对发热大鼠体温的影响:模型组与空白组比较:3h后模型组大鼠均出现体温升高,且体温呈平稳上升趋势,提示10%干酵母混悬液皮下注射的方法可以成功的制造大鼠发热模型;(2)给药后,各组体温变化:牛黄清心散组、布洛芬组及两药合用组大鼠体温均可不同程度降低,(P>0.05),差异有统计学意义,其中牛黄清心散组灌胃3h后开始起效,布洛芬组灌胃1h后开始起效,牛黄清心散与布洛芬合用组起效时间与布洛芬组基本相同,在退热维持时间上,三组基本相同,(P>0.05),差异无统计学意义。(3)各组对发热大鼠血清中cTnI含量的影响:各组相比,血清中cTnI水平轻微波动(P>0.05),差异无统计学意义。(4)牛黄清心散合布洛芬对大鼠肝脏的影响:在10×10倍的光学显微镜下观察各组肝脏切片发现,肝组织结构清晰,肝细胞大小均匀,无变性、坏死,肝小叶结构完整,形态正常,小叶内肝细胞索排列整齐,局部有少量胶原着色,肝细胞较正常肝细胞未见明显变化。
结论:(1)造模成功后,大鼠体温开始升高,体温可维持9h;(2)牛黄清心散与布洛芬都具有降低体温的作用,起效时间不同,但维持时间相当,提示临床在退热时可于服用布洛芬3h后再服用牛黄清心散,可延长退热时间;(3)牛黄清心散与布洛芬合用对肝脏无明显影响,可快速持续降温,无毒副作用;(4)牛黄清心散与布洛芬合用对心肌肌钙蛋白影响不大,但对心肌细胞的损害尚待进一步研究。