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研究目的:1、建立炎症介质及其代谢产物的分析方法。2、构建2型糖尿病和高脂血症的炎症介质特征谱。3、基于糖脂代谢紊乱性疾病炎症介质特征谱,探讨参芪降糖颗粒治疗2型糖尿病和高脂血症的作用机制。研究方法:1、炎症介质分析方法的建立通过超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-Triple Quad-Mass Spectrometry,UPLC-QQQMS)系统和多反应监测技术(multiple reaction monitoring,MRM),对炎症介质特征离子碎片进行鉴定,实现87种炎症介质的定性分析。通过优化分离条件和检测条件,完善方法学考察,建立炎症介质的定量分析方法。2、2型糖尿病和高脂血症炎症介质特征谱的构建通过已建立的炎症介质分析方法,选取造模成功的2型糖尿病和高脂血症动物,对血浆样本中的炎症介质含量进行测定。数据经标准化处理后,通过多元统计和单变量统计分析相结合的数据分析方法,寻找2型糖尿病和高脂血症中的特征炎症介质,建立糖脂代谢紊乱性疾病炎症介质特征谱。3、参芪降糖颗粒治疗糖脂代谢紊乱性疾病的作用机制研究观察参芪降糖颗粒调节2型糖尿病和高脂血症空腹血糖、总胆固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇的效果。通过分析参芪降糖颗粒治疗2型糖尿病和高脂血症的差异炎症介质,初步阐释参芪降糖颗粒治疗糖脂代谢紊乱性疾病的作用机制。结果:1、炎症介质分析方法的建立通过优化样品前处理方法、分离条件和检测条件,建立了一种20min检测87种炎症介质的分析方法。该方法所有标准校正曲线均为线性,校正回归系数在0.9351~0.9999之间,能快速准确地定量分析多种炎症介质。2、2型糖尿病和高脂血症炎症介质特征谱的构建高脂高糖饲料加链脲佐菌素构建的2型糖尿病有6个特征炎症介质;高脂高糖饲料构建的高脂血症有10个特征炎症介质。糖脂代谢紊乱性疾病炎症介质特征谱包括13个炎症介质:(±)12(13)-Di HOME、Eicosapentaenoic Acid、Docosapentaenoic Acid、15-ketoprostaglandins E2、DGLA、Adrenic Acid、(±)9(10)-Di HOME、5(S)-HETE、(±)5-HETE、Arachidonic acid、Linoleic Acid、9(S)-HODE和13-Oxo ODE。13个炎症介质涉及不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢和花生四烯酸代谢通路。3、参芪降糖颗粒治疗糖脂代谢紊乱性疾病的作用机制研究参芪降糖颗粒在治疗2型糖尿病和高脂血症的过程中,均有10个炎症介质发生改变,且都涉及亚油酸代谢和花生四烯酸代谢通路。发现参芪降糖颗粒治疗糖脂代谢紊乱性疾病作用机制包括:(1)通过抑制LOX酶的活性,阻断5-LOX/15-LOX代谢通路中5-HETE、15-HETE和LTs等过氧化物的形成,减少机体炎症。(2)通过激动PPAR-γ,抑制CYP2C8和s EH酶的活性,提高机体内EETs的水平,从而减少氧化应激。结论:本课题建立了一种20 min同时定量检测87种炎症介质的分析方法,并应用于参芪降糖颗粒治疗2型糖尿病和高脂血症动物实验中。初步构建了以13个炎症介质为代表的糖脂代谢紊乱性疾病炎症介质特征谱,发现参芪降糖颗粒治疗糖脂代谢紊乱性疾病的作用机制与5LOX/15LOX-HETEs和PPARγ-s EH-EETs有关。