面粉中毒麦成分检测方法研究

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面粉作为人类的主要食物来源有着举足轻重的地位。作为加工面粉的原料小麦,经常能截获到有毒植物种子——毒麦。资料显示,我国小麦产区以及出口小麦的国家如:美国、澳大利亚、德国、法国、阿根廷及东北亚、中亚和独联体国家均是毒麦的主要分布区,也有多起国人因误食含毒麦碱的面粉而引起中毒事件发生的报道。毒麦种子含有毒麦碱(Temuline-C7H12N2O),能麻痹动物中枢神经。人吃了含4%毒麦成分的面粉就会引起中毒反应,家禽食入体重0.7%剂量的毒麦时就会中毒。据不完全统计,1983年我国因食用毒麦或含毒麦成分的面粉制品而中毒的人数多达1200人次。目前我国对于面粉中毒麦成分含量的检测未见有相关报道,因此,建立有效、准确、实用、快速的分子生物学检测鉴定方法非常重要。本研究应用单核苷酸多态性(SNP)技术和双重实时荧光定量PCR技术对面粉中的毒麦成份进行快速检测。采用SNP技术和TaqMan-MGB探针对面粉中的毒麦成分的单碱基进行检测分析。结果表明:探针Du-57可以特异性鉴定出面粉中的毒麦成分。使用的TaqMan-MGB实时荧光PCR技术稳定性和特异性高,且其淬灭基团与报告基团比其他探针在空间位置上更加接近,实验结果更精确。在上述两种检测方法中:单核苷酸多态性(SNP)技术在近似种鉴定上具有稳定性高,读数方便,同时可检测上百个数据,具有基因芯片检测技术等高通量特点,适用于大规模样品的筛查,缩短了检疫鉴定时间;TaqMan-MGB实时荧光定量PCR技术具有特异性强,敏感度高,重复性好,并有较强安全性的特点。
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