法夫酵母胞内⁶G-呋喃果糖苷酶,在以高浓度蔗糖为底物时,能够生产新科斯糖作为主要转糖基产物。新科斯糖（neokestose）是一种蔗果三糖族低聚糖,由果糖基C-2与蔗糖分子中的葡萄糖基C-6位相连所得,与其他低聚果糖相比具有更好的益生菌功能和稳定的化学特性。论文以法夫酵母（Xanthophyllomyces dendrorhous 269）为出发菌株,摇瓶发酵收集菌体后,对法夫酵母的破壁方法进行了研究。结果表明:高压细胞破碎方法的破壁率为89.8%,高压均质方法的破壁率达到87.5%,均明显优于冻融法的50.1%。然而,高压均质法破壁率虽然较高,但是不能进行温度控制,使得酶活性受到影响;而采用高压细胞破碎仪进行破碎,蛋白质的含量较高,酶的活力也大大高于其他的破碎方法。本文对胞内⁶G-呋喃果糖苷酶的分离纯化也进行了研究。粗酶液经聚乙二醇（PEG） 20000浓缩后,上DEAE纤维素52阴离子交换柱两次层析得到电泳纯的酶蛋白,总酶活回收率为13.4%,比酶活为238.64 U/mg,比粗酶液提高了35倍。经SDS-PAGE分析,胞内⁶G-呋喃果糖苷酶的分子量约为33 kDa。纯化后的胞内⁶G-呋喃果糖苷酶的酶学性质研究表明,胞内⁶G-呋喃果糖苷酶的最适温度为45℃,最适pH为6.4;在pH4.0～7.0的范围内和小于45℃时具有较好的稳定性。Ca²⁺,Li⁺,Mn²⁺,Ba²⁺和Al³⁺对酶具有1.25?1.4倍的激活作用,Zn²⁺对酶活性有较小的抑制作用,而K⁺和Mg²⁺则没有显著的影响。EDTA对酶活力有显著的激活作用,而SDS则具有明显的抑制作用,残余酶活仅为65%。对于胞内⁶G-呋喃果糖苷酶的转移活性,米氏常数Km和最大反应速率Vmax分别为511 mmol/l、233μmol/（min·mg）;水解活性的Km,Vmax值分别是62 mmol/l和164μmol/（min·mg）,其底物抑制的解离常数877 mmol/l。在40%蔗糖作为底物时,最大neo-FOS的产量为73.9g/l。工业化过程中生产低聚果糖一般采用粗酶液,为了更好的控制低聚果糖的工业化生产,对法夫酵母胞内粗酶液的酶学性质进行了研究,结果显示:该酶最适pH为6.4,最适温度为60℃;在温度小于70℃,pH4.0～7.0范围内,酶具有较好的稳定性。Zn²⁺和Mg²⁺对酶活力有抑制作用,SDS对酶的抑制作用最为显著,残余活力仅为64.56%;Ba²⁺,Al³⁺对酶活性有较少促进作用。