【摘 要】
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目的:检测赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）在膀胱癌中的表达水平与临床病理特征的关系及KMT2D对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:免疫组化实验和q RT-PCR实验分别检测膀胱癌组织和癌旁组织中KMT2D蛋白和m RNA表达水平。根据免疫组化评分将患者分为KMT2D低表达组和KMT2D高表达组,比较两组患者的临床病理特征。蛋白免疫印迹实验检测膀胱癌细胞5637、T24、TCCSUP和正常膀胱上皮
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目的:检测赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）在膀胱癌中的表达水平与临床病理特征的关系及KMT2D对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:免疫组化实验和q RT-PCR实验分别检测膀胱癌组织和癌旁组织中KMT2D蛋白和m RNA表达水平。根据免疫组化评分将患者分为KMT2D低表达组和KMT2D高表达组,比较两组患者的临床病理特征。蛋白免疫印迹实验检测膀胱癌细胞5637、T24、TCCSUP和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中KMT2D蛋白表达水平。将mi R-NC质粒和mi R-KMT2D质粒转染至膀胱癌细胞5637、T24和TCCSUP中,蛋白免疫印迹实验检测转染效率。通过MTT和transwell实验分别检测转染成功后细胞的增殖以及侵袭情况。结果:膀胱癌组织中KMT2D蛋白免疫组化评分为（43.0±6.7）分低于癌旁组织（92.1±5.9）分,t=17.371,P＜0.001。膀胱癌组织中KMT2D m RNA相对表达水平为（0.8±0.2）低于癌旁组织（2.6±0.4）,t=7.606,P=0.002;对比KMT2D低表达组与高表达组,分别在患者的年龄、肿瘤分化程度、和浸润深度之间差别具有统计学意义（P＜0.05）;KMT2D蛋白在膀胱癌细胞5637、T24和TCCSUP中的表达水平分别为（0.38±0.03）、（0.42±0.03）、（0.36±0.05）均低于SV-HUC-1的表达水平（0.92±0.06）,q=21.131、19.584、21.647,均P＜0.001;mi R-NC质粒和mi R-KMT2D质粒转染至5637、T24和TCCSUP细胞后,5637-KMT2D、T24-KMT2D、TCCSUP-KMT2D组KMT2D蛋白水平明显增加;细胞培养72h时,5637-KMT2D组细胞OD值（0.73±0.05）低于5637-NC组（1.34±0.07）（t=8.241,P＜0.001）,T24-KMT2D组细胞OD值（0.67±0.06）低于T24-NC组（1.12±0.06）（t=9.524,P＜0.001）,TCCSUPKMT2D组细胞OD值（0.62±0.07）低于TCCSUP-NC组（1.32±0.06）（t=8.941,P＜0.001）;5637-KMT2D组细胞发生侵袭细胞数（34.5±4.7）低于5637-NC组（56.0±5.2）（t=3.524,P=0.008）,T24-KMT2D组细胞发生侵袭细胞数（36.4±4.5）低于T24-NC组（68.5±6.7）（t=7.302,P＜0.001）,TCCSUPKMT2D组细胞发生侵袭细胞数（30.1±3.4）低于TCCSUP-NC组（74.2±6.5）（t=8.206,P＜0.001）。结论:KMT2D在膀胱癌中表达水平明显低于癌旁组织,说明KMT2D在膀胱癌组织中发挥调节细胞代谢及增殖等方面的作用;增加KMT2D的表达水平后可减弱细胞增殖和侵袭能力,KMT2D有望成为治疗膀胱癌有效靶点。
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