免疫分离结合表面增强拉曼快速检测牛奶中的三聚氰胺

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三聚氰胺为非法添加剂,不法商人将其添加到婴幼儿的奶制品中,被婴幼儿摄入体内导致肾结石甚至肾衰竭,严重影响了众多儿童的生命安全。针对三聚氰胺违法添加问题,本论文对三聚氰胺的快速检测方法展开了研究。  本研究利用免疫分离结合表面增强拉曼的方法来快速准确检测牛奶中的三聚氰胺。首先利用免疫方法快速准确地将牛奶中的三聚氰胺分离出来,通过优化确定抗体快速分离牛奶中三聚氰胺的最佳工作条件为:抗体与G蛋白结合时间为10min,磷酸盐缓冲液的洗脱时间为1min/次,洗脱缓冲液的洗脱时间为5min,洗脱缓冲液为甘氨酸(用HCl调pH至2.7)。  通过扫描电子显微镜直观地确定了表面增强拉曼基底的置换反应时间,即硝酸银与锌片的反应时间为50秒时,可以得到结构最整齐的树枝状纳米银。  表面增强拉曼光谱表明,添加三聚氰胺的牛奶样品的图谱在三聚氰胺的特征峰(680cm-1)处有明显的增强,而未添加三聚氰胺的牛奶样品的图谱并未在三聚氰胺的特征峰(680cm-1)处有明显的增强。且实验对三聚氰胺的检出限为0.1 ppm(100μg/L)。  本研究建立的免疫分离结合表面增强拉曼光谱检测牛奶中的三聚氰胺时间简短,灵敏度高,特异性好以及样品前处理简单,适合多种乳制品中三聚氰胺的快速检测。
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