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目的miR-147在不同类别肿瘤中表达存在差异,主要在肿瘤细胞的侵袭、增殖和转移中起着不同的作用,为研究miR-147b-5p对胃癌AGS、MGC-803细胞E MT及侵袭、迁移的影响,通过瞬时转染胃癌细胞系,构建过表达和沉默miR-147b-5p的重组胃癌细胞系,利用划痕、Transwell等实验模拟胃癌侵袭转移模型,研究miR-147b-5p参与胃癌细胞迁移、侵袭以及上皮间充质转化(Epithelial-toMesenchymal Transition,EMT)过程。为研究胃癌的EMT及转移相关机制提供新的潜在分子标记物,同时也为胃癌的靶向治疗提供新的研究方向和研究思路。方法通过瞬时脂质体转染法将合成的agomir-147b-5p、antagomir-147b-5p,以及阴性对照序列(NC)质粒分别转染AGS与MGC-803胃癌细胞株,并设立未转染空白对照组Blank,于荧光显微镜下观察胃癌细胞的转染效率,并通过qRTPCR检测两种胃癌细胞各重组细胞系中miR-147b-5p的相对表达水平,通过划痕、Transwell模拟胃癌侵袭转移模型,观察转染前后胃癌细胞侵袭和迁移能力的变化。Western blot等方法检测过表达miR-147b-5p或沉默miR-147b-5p后EMT相关蛋白上皮型钙黏附分子(E-cadherin)、神经型钙黏附分子(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达变化情况。结果瞬时转染胃癌细胞株AGS及MGC-803后,荧光显微镜下观察细胞转染效率约80%左右,miR-147b-5p的表达水平通过qRT-PCR测定,结果显示两种胃癌细胞agomir-147b-5p组中miR-147b-5p的表达水平均明显高于NC组及Blank组(P<0.001)。Transwell实验观察到两种胃癌细胞中agomir-147b-5p组侵袭及迁移的细胞计数均显著少于NC组及Blank组(P<0.05),antagomir-147b-5p组中侵袭及迁移细胞计数则明显升高,NC组与Blank组之间无显著差异(P>0.05)。此外,划痕试验也表明两种胃癌细胞中agomir-147b-5p组的细胞迁移率明显低于NC和Blank组,NC和Blank组之间无显著差异(P>0.05)。Western blot实验发现agomir-147b-5p组胃癌细胞EMT相关蛋白E-cadherin的表达显著上调,而N-cadherin和Vimentin表达显著下调(P<0.05),相反,antagomir-147b-5p组E-cadherin的表达下调(P<0.05),而N-cadherin和Vimentin表达则上调(P<0.05),NC和Blank组之间并无显著差异(P>0.05)。结论我们的研究表明miR-147b-5p参与了胃癌EMT及侵袭、迁移的调节,初步揭示了miR-147b-5p具有抑制胃癌细胞侵袭及迁移能力,发挥潜在抑癌基因的作用,并可能通过上调E-cadherin以及下调N-cadherin、Vimentin表达抑制胃癌EMT从而抑制胃癌远处转移,为胃癌转移机制提供了理论依据,并为晚期胃癌患者的靶向治疗提供新的靶点,开辟新的思路。