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植物在生长发育过程中会受到多种生物或者非生物逆境的影响,这些逆境不仅会影响植物的分布状况,在一定程度上也会决定植物的生存状态。在长期的进化过程中,植物形成了多种复杂的应答逆境机制以增强其适应性。植物体内的转录因子通过调控与生长发育、逆境应答及防御相关基因的表达进而影响植物的生存状态,是植物体内一种重要的调控方式。NAC转录因子与WRKY转录因子是植物中两个重要的转录因子超家族。本文初步研究了油菜（Brassica napus L.）NACa转录因子调控ROS累计及细胞死亡的机制及拟南芥（Arabidopsis thaliana）WRKYx转录因子在非生物逆境应答中的作用。实验室前期从油菜中成功克隆得到了基因BnaNACa,亚细胞定位实验表明BnaNACa定位于细胞核中,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析表明BnaNACa对冷害、脱落酸（Abscisic acid,ABA）及百草枯（Methyl viologen,MV）等非生物逆境都有响应。在本研究中,我们首先证实了BnaNACa为转录激活子。在烟草叶片中表达BnaNACa后,叶片出现类似超敏反应症状。邻苯二胺（3,3’-diaminobenzidine,DAB）染色及过氧化氢（Hydrogen peroxide,H2O2）定量实验显示在烟草（Nicotiana benthamiana）叶片中表达BnaNACa后,叶片中的H2O2不断累积,丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量也显著提高;接着,我们通过DNA梯状实验及末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧尿苷末端标记（TUNEL）实验发现表达BnaNACa的烟草叶片中,核DNA片段化、叶绿素含量降低、电导率及花青素含量明显升高,实验表明BnaNACa的表达引起了烟草叶片细胞死亡。进一步利用qRT-PCR及双荧光素酶报告系统发现BnaNACa可激活活性氧（Reactive oxygen species,ROS）及防御相关基因的表达。此外,利用在拟南芥中异位表达BnaNACa后获得的诱导型过表达株系进行表型分析实验,初步发现BnaNACa可参与ABA处理后植物根的延伸发育及植物叶片衰老过程,但仍需进一步的深入验证。AtWRKYx是实验室前期研究中克隆得到的一个拟南芥WRKY转录因子基因,酵母转录活性分析实验表明At WRKYx为转录抑制子。通过qRT-PCR实验发现At WRKYx对冷害（4℃）、葡萄糖（4%Glc）、热害（37℃）、盐害（200 mM NaCl）、聚乙二醇8000（Polyethylene glycol 8000,12.5%PEG8000）及ABA（50μM ABA）等非生物逆境都有响应;我们利用AtWRKYx的T-DNA插入突变体atwrkyx进行的萌发水平表型分析实验表明atwrkyx早期的萌发率高于拟南芥野生型（Col-0）;此外,双分子荧光互补（Bimolecular fluorescence complementation,BiFC）实验与酵母双杂交（Yeast Two-Hybrid,Y2H）实验表明At WRKYx可形成同源或异源二聚体。但是,关于AtWRKYx具体的功能鉴定与调控机制研究尚待进行。总之,我们的研究加深了人们对植物中NAC与WRKY两个转录因子家族基因在植物生长发育、逆境应答中的作用及调控机制的认识,为后续的研究工作奠定了基础。