蛋白酶与核酸前体及核黄素荧光作用研究

来源 :同济大学理学院 同济大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong437
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本文研究了蛋白酶与核酸前体的荧光作用。结果发现,核酸碱基Ade、Thy、 Cyt、Ura及核苷UR、DUR、GS对蛋白酶HSA、BSA的荧光淬灭作用很强且 符合稳态的Stern-Volmer线性方程,荧光淬灭速率常数kq达1010M-1S-1,属 于扩散控制,表明核酸碱基及核苷基态可作为电子受体与含色氨酸的蛋 白酶单重态发生具有电子转移性质的相互作用。这种作用导致形成活泼 的Trp+.和NB-.,从而同时导致核酸碱基和蛋白质的双重损害。同时观察 到核酸碱基、核苷对蛋白酶荧光淬灭的激发波长依赖性。λex在280-310 nm范 围改变时,kq-λex关系中均存在着两个区域:λex=295-310 nm的平伏区和 λex=280-295 nm的急速上升区。在这两个区域,荧光淬灭作用分别为电子 转移机理和ET-EnT共存机理。另外,在λex=287 nm时,脱氧尿苷DUR对 牛血清白蛋白BSA淬灭的Stern-Volmer曲线出现上翘现象,根据修饰的 Stern-Volmer方程和稳态与动态淬灭相结合理论求出了两者作用的稳态结合 常数KS和动态淬灭常数KD。 本文还进行了蛋白酶BSA与核黄素RF荧光作用的初步研究。结果表明,蛋 白酶BSA对核黄素RF有荧光淬灭作用,且作用很强,淬灭速率常数kq达到1013 M-1S-1。同时Stern-Volmer曲线发生了向x轴的偏离,说明有某种基态缔合物 的生成或发生了BSA对RF的不完全淬灭。
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