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近年来，现代分析技术尤其是液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术得到了迅速发展。其在天然药物化学、药物分析、药物筛选及中药现代化等领域的广泛应用均极大地促进了相关学科的发展。本文以乙酰胆碱酯酶抑制剂为研究对象，发展了基于固定化酶的乙酰胆碱酯酶抑制剂体外筛选模型和基于液质联用分析的乙酰胆碱酯酶抑制剂的快速筛选方法。为我国药用生物的真伪鉴别和活性成分快速发现研究提供了方法学参考。主要研究内容及结果简述如下：1.以可重复使用的固定化酶代替游离态酶，建立一种基于比色分析的乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEIs)体外筛选模型。采用以氨基化硅胶为载体固定的AChE，首先对实验条件进行优化，并用AChEIs阳性对照物他克林和毒扁豆碱对筛选模型进行验证，还对筛选模型技术参数进行评价，最后将新方法用于单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制活性评价。结果表明，方法验证及筛选模型技术参数评价结果良好，筛选模型对AChEIs筛选有较好的特异性和灵敏度，可以用于AChEIs的筛选。该方法具有适用性强、筛选结果可靠、固定化酶可以重复使用等优点，是单体化合物及天然产物粗提物AChEIs活性评价的有效方法。2.首次建立了液相-离子阱质谱法(LC-ESI-Trap/MS)筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂(他克林和毒扁豆碱)的新方法。首先，发展适用于他克林和毒扁豆碱的色谱、质谱分析方法，接着对抑制剂洗脱条件进行了系统优化，并在此基础上探索性的发展了基于靶酶亲和分离-液质联用分析筛选、鉴别乙酰胆碱酯酶抑制剂的新方法。其次，采用本研究发展的方法，对海胆和石莼粗体物中添加乙酰胆碱酯酶抑制剂进行筛选。结果表明，采用该方法能成功筛选出复杂天然产物粗提物的微量高活性乙酰胆碱酯酶抑制剂，被测化合物分离良好，信号强度高，易于鉴别。相比于比色法，该方法在复杂体系中筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂具有更好的特异性和灵敏度。说明本法可以实现药用生物复杂基质中低浓度乙酰胆碱酯酶抑制剂的准确定性、定量，为天然药物中乙酰胆碱酯酶抑制成分的筛选、鉴别提供了方法支持。