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一、研究背景：
我国目前约有癫痫患者逾千万，其中30％的患者经过规范的药物治疗后不能满意控制发作，发展为难治性癫痫。针对其病因学的研究发现，造成难治性癫痫的脑组织病变主要包括皮质发育不良和肿瘤两大类。2004年至2007年，宣武医院功能神经外科手术切除的全部难治性癫痫患者脑组织标本中，病理诊断为局灶性皮质发育不良(focal cortical dysplasia，FCD)的病例占50％以上。现阶段，开颅手术仍然被认为是治疗难治性癫痫的最佳方法，但随着病理诊断水平的不断提高，更多的研究人员开始着眼于对难治性癫痫发病机制的探讨，以期能够开发具有针对性的药物治疗方法，提高患者的生活质量。
值得注意的是，在难治性癫痫的患者中，多数表现为对多种抗癫痫药物的耐受，尽管这些药物具有不同的结构和作用机制，这说明，存在一种共同的机制影响抗癫痫药物的作用。已有研究表明，P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein，MRP)和肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein，LRP)可能参与了该机制。国外相关研究证实，在难治性癫痫患者脑组织中，存在上述三种耐药蛋白的过度表达，其表达部位不同，作用机制尚待深入研究。
国内目前针对难治性癫痫相关耐药蛋白的研究较少且存在一定的局限性：一方面，由于病例的相对匮乏，针对患者手术切除脑组织进行的研究极少，大部分研究仍以动物为主要对象；另一方面，现有的研究中，缺乏对于病变脑组织病灶和病灶周围区域耐药蛋白表达情况的比较研究，对于不同耐药蛋白表达情况的横向比较亦较为少见，而我们认为，这恰恰是从不同层面、不同角度阐释难治性癫痫耐药机制的关键所在。此外，在研究对象的选取上，多数研究倾向于肿瘤性病变。这使我们认识到，针对难治性癫痫相关FCD患者脑组织中耐药蛋白表达情况的研究，在国内具有重要的现实意义。二、研究目的：
通过对P-gp、MRP和LRP在难治性癫痫相关FCD脑组织中表达部位的初步研究，以及对其在不同程度病变脑组织中表达量的比较研究，促进阐明难治性癫痫的耐药机制，为癫痫患者的临床合理用药提供理论依据。
三、研究方法：
1.实验对象的选取及分组方法：
选取16例难治性癫痫患者手术切除脑组织标本作为病例组，病理诊断FCD Ⅰ A型3例，FCD Ⅰ B型5例，FCD Ⅱ A型4例，FCDⅡ B型4例。选取5例无癫痫发作病史的胶质瘤患者的病灶周围脑组织标本作为对照组。按照病变的严重程度进行分组，8例FCDⅠ型病例为A组，8例FCDⅡ型病例为B组，其中FCDⅡ型病例的病灶周围区域及病灶区域分别为BA和BF组。5例对照组资料为C组。
2.实验方法：
部分脑组织标本经20％PBF固定后进行切片，应用Envision二步法进行免疫组织化学标记，观察P-gp、MRP和LRP在FCD病变脑组织中的表达部位和表达强度，后者以着色强度为指标进行判定。
部分脑组织标本经-80℃低温冰箱冻存后进行匀浆、离心，应用Western-Blot法进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，经ECL法显影后，得到P-gp、MRP和LRP三种待测蛋白条带，应用ImageJ 1.38x图像分析系统对所得结果进行分析，从而得到待测蛋白定量测量结果。
3.数据统计分析：
应用SPSS for Windows Ver．11.5统计分析系统，按照分组方法将每种待测蛋白定量测量数据进行分组，对于每一组符合正态分布的资料用均数±标准差来表示其平均水平；对于每一组不符合正态分布的资料用中位数来表示其平均水平。选择运用秩和检验(Rank Sum Test)进行总体和/或组间比较分析，以P<0.05表示差异具有统计学意义，P<0.01表示差异具有高度统计学意义。
四、实验结果：
1.一般情况：16例难治性癫痫患者，平均发病年龄10.22岁，平均手术年龄21.13岁，平均病程10.91年。其中男性9例，女性7例。病变位于颞叶8例，位于额叶7例，其他部位1例。临床症状以癫痫发作为主。5例胶质瘤患者平均手术年龄40.8岁，其中男性3例，女性2例。
2.P-gp主要表达于脑组织内的毛细血管内皮细胞，部分神经元成分也有阳性表达，其表达强度随病变严重程度的增加而提高。与相对正常脑组织相比，P-gp在难治性癫痫相关FCD脑组织中呈显著过度表达，在相同程度病变脑组织中，P-gp在病灶区域的表达高于病灶周围区域。
3.MRP主要表达于脑组织内的神经元成分，其表达强度不随病变严重程度的增加而提高。与相对正常脑组织相比，MRP在难治性癫痫相关FCD脑组织中呈显著过度表达，在相同程度病变脑组织中，MRP在病灶区域与病灶周围区域的表达没有明显差异。
4.LRP主要表达于脑组织内的毛细血管内皮细胞，其表达强度随病变严重程度的增加而提高；在FCDⅡB型病例病灶区域的基质和气球细胞中，其呈现强阳性表达。与相对正常脑组织相比，LRP在难治性癫痫相关FCD脑组织中呈显著过度表达，在相同程度病变脑组织中，LRP在病灶区域的表达高于病灶周围区域。
五、结论：
1.难治性癫痫相关FCD脑组织中存在耐药蛋白的表达。
2.P-gp、MRP和LRP三种耐药蛋白在FCD脑组织中的表达部位不同，其中P-gp主要表达于毛细血管内皮细胞，MRP主要表达于脑组织内的神经元成分，LRP的表达则涵盖了毛细血管内皮细胞、气球细胞及病灶区域部分基质。提示三种耐药蛋白具有不同的作用机制。
3.P-gp、MRP和LRP在难治性癫痫相关FCD脑组织中的表达均显著高于相对正常脑组织。
4.P-gp、MRP和LRP在FCDⅡ型病例的病灶区域表达高于病灶周围区域。