霍乱是一种古老且广泛流行的急性肠道感染疾病,可导致剧烈的水样腹泻、脱水甚至死亡,至今仍然是发展中国家公共卫生领域的巨大威胁。引起霍乱的病原体是一种革兰氏阴性、单鞭毛、具有游动性的弧状细菌——霍乱弧菌。这种病原菌通常生活在淡盐水环境中,通过污染的食物或水被人体摄入后,经消化道进入小肠,穿过粘液层后开始在小肠内定殖。在宿主体内时,霍乱弧菌能够感知各种环境压力,并且可以调控一系列基因的表达以应对环境压力,包括活性氧类(Reactive Oxygen species,ROS)所造成的氧化压力。为了研究霍乱弧菌在应对ROS所造成的氧化压力时是如何调控基因表达的,本文通过用H202处理霍乱弧菌并且提取其RNA进行RNA Sequencing以获取霍乱弧菌在应对H202时的转录谱。结果表明,共有139个基因不同程度的被H202诱导或抑制表达。其中,VC0139这个基因被诱导表达的倍数最高。VC0139编码Dps(DNA-binding protein from starved cell)家族的一种同源蛋白。Dps高度保守,且具有重要的抗氧化功能。为了验证霍乱弧菌中Dps的抗氧化功能,我们构建了启动子报告载体检测dps的表达情况。结果表明,dps能够被H202诱导表达,该过程在对数期时受oxyR调控,进入稳定期后,受rpoS调控。当缺失dps后,与WT相比,dps缺失株表现出对有机氢过氧化物及无机氢过氧化物的敏感性。此外,本研究发现Dps与霍乱弧菌应对多种环境压力相关,如高铁离子胁迫等,与霍乱弧菌在VBNC状态下的存活也有一定关系。为了进一步研究dps的缺失是否会对霍乱弧菌的定殖以及其毒力基因的表达造成影响,我们分别进行了乳鼠体内竞争性定殖实验、毒力基因tcpA的表达情况检测、TcpA蛋白的检测,以及成年鼠体内的的竞争性定殖实验。结果表明dps的缺失并不会影响tcpA的表达。在成年鼠体内定殖时,野生型相比较dps缺失株而言有10倍左右的定殖优势,但是当我们用NAC清除肠道里的过氧化物时,这种定殖优势不复存在。这些结果表明,dps缺失影响霍乱弧菌在体内的抗氧化功能。综上所述,我们的结果表明dps对霍乱弧菌的抗氧化能力以及定殖能力方面有重要影响。由于Dps在细菌中,包括病原微生物中,高度保守,因此我们的结果对病原微生物定殖机制方面的研究有一定贡献。