延庆万寿菊种传病原鉴定及防治技术研究

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种传病原是多种作物田间病害发生的主要来源之一,随着万寿菊种植面积的扩大,万寿菊病害发生也随之逐年严重。本文分离鉴定了北京市延庆地区万寿菊种植基地万寿菊自制种中主要的病原物。研究结果表明,延庆地区自制种中主要携带的病原物为链格孢菌,且经形态学与分子学的鉴定包括两种链格孢菌Alternaria alternata(A)和Alternaria tagetica(B),其它主要病原物包括镰刀菌Fusarium sp.。2012年与2013年两年自制种所携带的链格孢菌百分率分别是35%和50%,而镰刀菌则只有1%和2%。结果表明链格孢菌是万寿菊种子携带的主要病原物,是万寿菊种子处理所要减少的主要病原物。不同种子消毒方法的消毒效果也是以该消毒方法对链格孢菌的杀菌效果体现的。本文采用不同消毒方法及不同药剂对万寿菊种子进行了消毒处理,并比较了各方法之间的消毒效果。温汤浸种采用了四种处理条件,分别调整浸种温度和浸种时间,结果表明,消毒效果随着浸种温度和浸种时间的提高而增加,但种子的发芽率却是随着这两者升高而降低。本文的研究结果说明本次温汤浸种的条件不适合万寿菊种子消毒。本文也采用了应用广泛的药剂浸种,分别采用不同的药剂浸种或者拌种,实验结果表明,浸种的处理效果明显优于拌种处理。浸种处理中含有嘧菌酯的两种处理方法的消毒效果优于其它浸种处理,链格孢菌的杀菌效果达到了95.07%和87.50%,总的杀菌效果达到了50.87%和86.93%,是这些处理中处理效果最佳的两种处理方法。其中嘧菌酯1800倍液浸种8h的消毒效果最佳,说明嘧菌酯是控制链格孢菌的有效药剂。采用熏蒸剂对种子进行熏蒸处理是目前国内外研究较少的内容,而本文研究了三种熏蒸剂对种子熏蒸的杀菌效果。采用的熏蒸剂分别是溴甲烷、炔丙基溴和羰基硫。实验结果表明,溴甲烷和炔丙基溴处理48h后链格孢菌的携带率显著减少了,并且随着熏蒸剂浓度的升高而逐渐下降,而羰基硫处理后链格孢菌的减少量显著低于这两种药剂。综上研究表明,适合万寿菊种子消毒的方法及药剂主要是嘧菌酯1800倍液浸种8h和溴甲烷、炔丙基溴熏蒸处理48h,对万寿菊种子都有很好的控制效果。根据Miguelángel Pavón等2010报道的使用特异性引物检测食品中链格孢菌种群的研究表明,Aalt DAlta1/Ainf IAlta1引物可以特异性地检测到链格孢菌Alternaria alternata。因此根据该特异性引物设计荧光定量PCR检测万寿菊种子种链格孢菌Alternaria alternata,通过建立标准曲线及准备已知带菌量种子的样品检测未知带菌量种子样品中Alternaria alternata的含量。实验结果表明,本次设计的荧光定量PCR方法能够比较准确地检测到带菌量为10%以上的种子样品,对于带菌率过低或者过高可能检测结果的准确性不够。
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