纤维素酶产生菌的分离鉴定、系统发育分析及发酵条件与酶学性质研究

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从四川卧龙中国保护大熊猫研究中心提供的野外放归大熊猫“祥祥”的12份粪样中进行产纤维素酶细菌的分离,通过刚果红染色法分离到51株能在“羧甲基纤维素钠(CMC-Na)—刚果红”平板上产生水解圈的菌株。挑选8株水解圈较大的菌株点种于“纤维素粉—刚果红”平板进行初筛,从中筛选出4株能在平板上产生水解圈的菌株,进一步进行摇瓶产酶复筛。最后得到一株传代性质稳定、高酶活的菌株,经初步鉴定为沙雷氏菌(Serratia)命名为Serratia JF-1116。 沙雷氏菌Serratia JF-1116革兰氏染色反应为阴性,无芽孢,菌体成直杆状,大小为0.5~0.8μm×0.9~2.0μm,菌体两端为圆形,兼性厌氧,有运动性。菌落白色湿润,生长温度范围为20~37℃,最适生长温度为28℃。该菌株可利用葡萄糖产酸,也能利用木糖、阿拉伯糖、甘露醇等产酸。过氧化氢酶呈阳性,利用柠檬酸盐和丙酸盐,可分解明胶。硝酸盐还原阳性,M.R阴性、V.P阳性,V.P培养物pH为5.4~6.5。 用PCR技术扩增了沙雷氏菌Serratia JF-1116的16S rDNA全序列,并对其进行了克隆和测序,对该序列在GenBank中的BLAST结果表明,所有与该序列高度同源的序列都为肠杆菌科(Enterobacteriaceae)的16S rDNA基因序列,其中相似性最高的为serratia属的菌株。该序列与serratia属的几个模式菌
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